第十三章_可见和紫外分光光度法.pptVIP

Lambart-Beer定律 A= εbc A= abρ ε与a的关系 ε = a M M：被测物质的摩尔质量 A= εbc = abρ εc = aρ c= ρ / M Lambart-Beer定律 A= εbc ε可应用标准溶液（浓度准确已知的溶液）求得 ε越大，测定的灵敏度就越高。 一般ε大于103 即可用分光光度法进行测定。 同一物质的溶液，在不同波长下ε不同 在λmax 处ε最大。 例 某化合物的相对分子质量为251，其浓度为1.50×10 －4 mol·L－1的溶液在480nm处用2.00cm的吸收池测定时的透光率为39.8%.求该化合物在480nm处的ε和a值. 解 A= － lg T = － lg0.398 = 0.400 ε480nm = A bc = 0.400 2.00 ×1.50×10 －4 = 1.33 ×10 3 L·mol－1 ·cm－1 a 480nm = ε M = 1.33 ×10 3 251 =5.30 L·g－1 ·cm－1 13.2 紫外-可见分光光度法 1.可见及紫外分光光度计 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 动画 光源 单色器 样品室 检测器 显示 在可见分光光度计中，常用的光源是钨灯 (1) 光源 钨灯可发出包含全部可见光波长范围的连续光谱，最适宜的波长范围是 360nm~1000nm 在紫外-可见分光光度计中还装有氢灯或氘灯。 氢、氘灯发射150～400 nm的连续光谱 单色器的主要组成：色散元件、入射狭缝、出射狭缝、和准直镜等部分。 (2) 单色器（单色光器，分光器） 单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 吸收池又称比色皿，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。 (3) 吸收池 吸收池的种类很多，其所装溶液液层厚度可在0.1~10cm之间，其中以1cm吸收池（即液层厚度为1cm ）最为常用。 (4) 检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 (5) 信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。 分光光度计的类型很多 目前国内广泛采用的721型分光光度计。具有结构简单、价格低廉、操作方便、维修也比较容易，适用于常规分析。 现在已有很多与计算机相联。 2. 测定方法及应用 (1) 标准曲线法 方法：配制一系列不同含量的标准溶液，选用适宜的参比，在相同的条件下，测定系列标准溶液的吸光度，作A-c曲线，即标准曲线，也可用最小二乘数处理，得线性回归方程。 在相同条件下测定未知试样的吸光度，从标准曲线上就可以找到与之对应的未知试样的浓度。 标准曲线 c A 相同的条件包括 ① 选择的入射光波长要相同（一般选择最大吸收波长λmax为测定波长）。 ② 吸收池厚度要相同。 ③ 选择的参比溶液（空白溶液）要相同。 参比溶液（空白溶液） 参比溶液是用作空白对照的溶液。测定试样溶液的吸光度之前，需先用参比溶液调节分光光度计，使参比溶液的透光率为100% （吸光度为0），以消除测定误差。 * * * * * * 分析化学的分类 化学分析 仪器分析 重量分析法 容量（滴定）分析法 酸碱滴定 氧化还原滴定 络合滴定 沉淀滴定 光谱分析法（UV、IR） 电化学分析法 色谱分析法（TLC、GC、HPLC） 第13章 可见和紫外分光光度法 §13.1 分光光度法基本原理 §13.3 原子吸收分光光度法 §13.2 可见-紫外分光光度法 §13.1 分光光度法基本原理 13.1.2 透光率和吸光度 13.1.1 吸收光谱的产生和吸收曲线 13.1.3 朗伯-比尔定律 分光光度法(spectrophotometry) 按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法、可见分光光度法和红外分光光度法。 分光光度法是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析和定量分析的分析方法。 其所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 分光光度法的分类 波长范围 紫外分光光度法 10nm ~ 380nm 可见分光光度法 380nm ~ 780nm 红外分光光度法 780nm ~ 300000nm a 与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快; b 灵敏度高; c ?选择性好; d 精密度和准确度较高; e