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微生物检验中培养基的质量控制分析
摘要:培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作非常重要的一个环节,培养基的质量直接影响到检测结果的准确性与有效性。本文就目前微生物检验中培养基的购置储存、制备及使用过程中可能存在的问题,从培养基的用水、容器选择、称量、灭菌、pH值测定,培养基的制备、融化、接种和培养、物理学和生物学质量控制等方面进行讨论,主要分析微生物检验中培养基的质量控制。
关键词:检测;培养基;质量控制Abstract:Preparationofmediaanduseismicrobiologylaboratorytestingworkveryimportantlinks,culturemediumqualitydirectlyaffecttheresultsofdetectionaccuracyandeffectiveness.Thispaperonthepresentinthemicrobialinspectionofthestoragemediumpurchase,preparationandprocessintheuseofthepossibleproblems,fromthewater,thecontainermediumchoice,weighing,sterilization,pHvaluedetermination,thepreparationofmedia,melting,vaccinationandtraining,physicsandbiologyqualitycontrolarediscussed,themainanalysisinthemediumofmicrobialexaminationqualitycontrol.
Keywords:Detection;Theculturemedium;Qualitycontrol
微生物实验室的检测依赖于培养基的质量,培养基质量的好坏直接影响检测结果的可靠性与准确性。自上世纪80年代以来,微生物培养基专业在研制开发领域发展迅速,但因在国内受生产工艺及设备的影响,欠缺对产品的有效分析方法,致使成品的培养基质量不等,对整体质量水平有一定的影响。
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般含有碳水化合物、无机盐(包括微量元素)含氮物质、以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。培养基的配置、灭菌是否合格,对微生物的生长、分离、鉴定及检验结果的正确与否起着至关重要的作用。因此把好培养基的质量关,对顺利完成实验及保证微生物检验结果的正确性和有效性起着至关重要的作用。
1、培养基原料的购置于储存1.1购置
培养基购置时应选择通过ISO9000质量认证的生产厂家,质量必须符合相关标准,同时要求生产厂家提供详细产品说明书,如产品名称、产品编号、批号、成分、培养基使用前的pH值、贮存条件及有效期等信息。另外企业是否通过了质量管理体系的认证是一项较为客观的评价依据。
1.2储存
干粉培养基应保存在专用药品柜中,药品柜要选择阴凉干燥处,避免阳光直射;开封后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮措施,使用期限为6个月。定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性、首次开封日期、培养基的感官状态、气味等,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象不应再使用。
2、培养基制备流程中各项指标的控制培养基用水
制备培养基所用水应使用蒸馏水或与其同质的水,最好不使用离子交换器生产的去离子水,更加不能使用自来水。
容器的选择
配制培养基常用容器为玻璃、搪瓷或不锈钢制品,不可以使用铜、铁材质的容器。玻璃器皿必须是中性硬料玻璃,否则影响培养基的酸碱度。分装培养基的容器最好为一次性无菌容器,若不能满足这样的条件,应将容器进行灭菌处理。
2.3称量
称量时每个培养基都要用专用的药匙,避免交叉污染而影响检验结果,称量用药匙要保证干净无杂物。干粉培养基易吸潮,如有条件,要在相对干燥的环境下称取。
2.4灭菌
一般培养基采用湿热灭菌,通常灭菌条件是121°C15-20min;干热灭菌条件为180-200C灭菌0.5-1h,含糖或特殊培养基,按照国家标准或生产商提供的说明灭菌。
已配制好的培养基必须立即灭菌,避免微生物消耗养分。同时高温容易破坏培养基的营养成分,还会使琼脂的凝胶强度下降,因此必须严格控制灭菌温度和时间,并且不可重复灭菌。
2.5培养基pH值的测定
微生物的生长不仅仅依赖丰富的营养,还需要在适宜的pH范围内才能正常生长繁殖或体现其生物学特性。
培养基配方要求的pH为培养基灭菌后的pH,除了特殊说明外,培养基灭菌并冷却到室温时培养基的pH变化不应超过0.2个pH单位。
在进行培养基pH值的调整时,一般使用浓度为0.5mol/L的N
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