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-内啡肽及其受体对电针抗抑郁快速起效的作用 以氟西泮为代表的选择性5-ht再萃取抑制剂（ssis）是目前临床应用最广泛的抗抑郁剂。然而,SSRIS抗抑郁效应迟于服药后2～4周,即存在临床疗效的迟后效应。在临床和实验研究中均发现针刺治疗抑郁症表现出快速起效的特点,在经过第一周治疗后,针刺组汉密尔顿抑郁量表(HAMD)减分率及疼痛模拟评分(VAS)均有显著性差异。 β-内啡肽(β-EP)作为主要的内阿片样物质,参与欣快、报酬行为等情绪调节活动。临床研究表明,抑郁症患者存在血浆β-EP及其他神经内分泌异常。有学者认为血浆β-EP可能是一有价值的、有助于抑郁症诊断的实验室指标。而针刺对β-EP的调节作用在针刺镇痛研究中得到广泛认可。故而对β-EP在电针抗抑郁快速起效中的作用进行了研究。 1 动物、动物及分组 盐酸氟西汀胶囊:20 mg/片,礼来苏州制药有限公司生产(批号:。Anti-opioid μ receptor,美国Millipore公司。 成年SD大鼠70只,体质量180～220 g,雄性,随机分为正常组(15只,群养)、造模组(55只,孤养)。上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号:CXK(沪)2007-0005。 2 方法和结果 2.1 应激性刺激法 依据Willner P的方法复制抑郁症大鼠模型。造模组共接受21 d各种不同的应激,包括冰水游泳(4 ℃,5 min)、热应激(45 ℃,5 min)、禁水(24 h)、夹尾(1 min)、电击足底(电压50 mV,每隔15 s刺激1次,每次持续10 s,共15次)、摇晃(1次/s,5 min)、禁食(24 h)和昼夜颠倒等刺激,平均每种刺激各3次。正常对照组,常规饲养,不接受任何应激性刺激。第21天测定造模组大鼠的糖水消耗量,评价造模是否成功。造模过程中死亡4只,剔除糖水消耗量最高的6只,经与正常组进行统计比较,具有显著性差异(P0.05),是为造模成功。造模成功者随机分为模型组、药物组、电针组各15只,各组间糖水消耗量经统计无差异。 2.2 电针组和多次用药 正常组:常规饲养,不予任何处理。模型组:0.9%NS灌胃,每日1次,连续7 d。药物组:给予盐酸氟西汀片1.8 mg/kg,将药物溶解于生理盐水中,配制成100 mL/kg溶液灌胃。每日1次,连续7 d。电针组:选择百会、印堂穴。针刺方法:常规穴位消毒,选用苏州医疗用品厂生产的“华佗”牌0.35 mm×10 mm针灸针进行治疗。百会穴、印堂穴均向背侧斜刺4 mm,针暴露在皮外的部分用绝缘胶布包裹,防止短路。连接电针。刺激参数:运用韩氏穴位神经刺激仪,选定2 Hz,输出电流1 mA,刺激时间15 min/次。电针组同时用生理盐水灌胃。每日1次,连续7 d。 在7天治疗结束后,测定各组大鼠的体质量、糖水消耗量和行为学(水平运动和垂直运动)。 2.3 实验方法 2.3.1 实验动物活动分析 Open-Field法进行实验大鼠行为学测定。敞箱为正方形,长、宽各100 cm,高40 cm,底面由面积相等边长25 cm的正方形25块组成,敞箱正上方2 m处架一数码摄像机,其视野可以覆盖整个敞箱内部。整个实验在光线为80 Lux安静无干扰的房间内进行,并保证每只实验大鼠在行为测验之前至少12 h未受到外界应激,每只大鼠单独测试。以动物穿越底面的块数为水平活动(crossing)得分,以直立次数为垂直活动(rearing)得分。采用SLY-ETS分析系统(北京硕林苑公司)计算活动得分。每次测定3 min。 2.3.2 糖的消耗实验 测量实验动物24 h饮用1%蔗糖溶液的量。 2.3.3 外周血弓状核受体基因型检测 各组中随机取12只大鼠进行酶联免疫法测定血浆和下丘脑β-EP(美国RD ELISA试剂盒),随机取3只大鼠进行免疫组织化学法测定下丘脑弓状核μ受体(一抗为Anti-Opiod μ receptor,美国Millipore公司)。 2.4 统计分析 利用SPSS17.0统计软件采用ANOVA统计方法处理数据。 2.5 结果 2.5.1 组大鼠血糖的变化 在治疗7 d时,模型组、药物组、电针组与正常组相比,体质量均低于正常组,差异有显著性意义(P0.01);3组组间比较,体质量变化无明显差异(P0.05)。与模型组相比,药物组糖水消耗量无明显变化(P0.05);而电针组显著上升,高于药物组(P0.05),与模型组相比有显著性差异(P0.01),但未及正常水平(P0.05)。模型组水平活动积分明显降低,与正常组比较,有显著性差异(P0.05);与模型组相比,药物组无明显变化(P0.05);而电针组显著上升,与模型组、药物组相比均有显著差异(P0.01),且与正常水平相当(P0.05)。模型组、药物组、电针