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川芎提取物对糖尿病大鼠糖尿病血糖的影响 关于川药的药理学研究，赛格等人报告了川药提取物对大鼠血脂的影响。对于四川提取物的研究，赛格等人认为它可以抑制苯并（h）和细胞内的dna结合。这些研究结果表明，川药虽然能改善糖尿病患者的手足坏死和发病率，但关于川药降血糖作用的文献很少。所以笔者试图探讨川芎提取物对血糖的影响以及作用机制, 报道如下。 1 材料表面 1.1 实验动物 1.2 其他催化剂和酶 血糖 (Bio-Basic INS公司, 加拿大) , 葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂 (Sigma公司, 美国) ,125I-胰岛素试剂盒 (Shibayaki, 涩川, 日本) , ED-TA (Sigma公司, 美国) , β-巯基乙醇 (Sigma公司, 美国) , ATP (Sigma公司, 美国) , NADP+(Sigma公司, 美国) , 葡萄糖-6磷酸脱氢酶 (Sigma公司, 美国) , 组氨酸 (Sigma公司, 美国) , 葡萄糖-6磷酸 (Sigma公司, 美国) , 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 (Sigma公司, 美国) , 柠檬酸钠 (Junsei公司, 日本) , 乙酰辅酶A (Sigma公司, 美国) 。 1.3 生命质量与仪器 旋转式真空蒸发器Eyela N-1000 (东京, 日本) , 紫外/可见分光光度计Thermo Genesys10 UV (Waltham, 美国) , 恒温培养振荡器生命科学SH-802F (Bucheon Korea) , γ光谱仪National Security Technologies Canberra HPGe公司 (普拉特维尔, 美国) , 高速真空浓缩机Jouan RC10-22 (巴黎, 法国) , 电热套MS-E107 (首尔, 韩国) 。 1.4 加热时间的确定 川芎购自锦山药材市场 (产于韩国庆北道安东) , 提取溶液是H2O、50%Et OH和100%Et OH。用H2O提取时, 在容积10 L圆底烧杯中放入1 kg川芎, 7 L的蒸馏水, 放入冷凝管, 在100℃电热套中加热5 h, 重复3次。50%Et OH和100%Et OH提取液在10 L圆底烧杯中放入1 kg川芎, 加入7 L的50%Et OH或100%Et OH, 以上同样方法加热5 h, 重复3次。合并提取液用滤纸过滤。减压浓缩机45℃浓缩, 用高速真空浓缩机浓缩后得到干燥粉末, 备用。 2 测试方法 2.1 实验动物的制备 按照KimKang法进行血糖动物繁殖及测试。1周性情稳定后, 选择250~300 g大鼠, 5只为一组, 分别为:正常组 (正常组) 、链脲佐菌素糖尿病大鼠组 (STZ组) 、链脲佐菌素糖尿病大鼠50%Et OH提取液组 (STZ+50%Et OH组) 、链脲佐菌素糖尿病大鼠100%Et OH提取液组 (STZ+100%Et OH组) 、链脲佐菌素糖尿病大鼠水提取液组 (STZ+H2O组) 。 糖尿病大鼠模型制作:5 ml柠檬酸缓冲液 (p H值4.5) 溶液, 按照50 mg/kg链脲佐菌素的标准制作注射液, 进行腹腔注射, 破坏胰腺的β细胞, 以此来诱发2型糖尿病。饲育6 d, 绝食16 h后, 从尾静脉抽血进行血糖检查, 血糖值在240 mg/dl以上的大鼠选为实验动物。正常组用5 ml的柠檬酸缓冲液 (p H值4.5) 注射, 相同方法检测, 血糖值范围在60~70 mg/dl的大鼠选为实验动物。STZ+50%Et OH组, STZ+100%Et OH组和STZ+H2O组, STZ组注射7 d后, 川芎提取物粉末1 g/L用H2O溶解, 用导管口腔灌胃日每天1次, 饲育3周。正常组和STZ组用同体积相同的方法灌胃3周饲育。饲育室温度为20~25℃, 湿度为50%~60%, 灯光照射间隔12 h。 2.2 羟甲基氨基甲烷/盐酸缓冲液法 节食16 h后, 取血液以3 000 r/min、4℃离心15 min, 从血液中提取葡萄糖和胰岛素测定。注射0.9% (W/V) 的NaCl溶液清除血液, 摘取肝脏, 用刀片切碎, 组织碾磨器进行组织破碎, 使用100 mmol/L三羟甲基氨基甲烷/盐酸缓冲液, 5 mmol/L乙二胺四乙酸, 10 mmol/Lβ-巯基乙醇含有的150 mmol/L KCl溶液 (pH值7.4) 20% (W/V) 取组织破碎液, 组织破碎液10 000 g离心15 min分离细胞核和线粒体, 采取上清液用来作为酶原。 2.3 观察指标 2.3.1 葡萄糖标准溶液的配制 葡萄糖氧化酶和过氧化物酶利用酶反应生成的酸化性邻联茴香胺的吸光度425 nm的测定定量, 葡萄糖标准溶液浓度为25%、50%、100%、150%;利用葡萄糖溶液, 血清是同样体积的