精原细胞发育过程中精细胞形态结构演变的透射电镜观察.docxVIP

精原细胞发育过程中精细胞形态结构演变的透射电镜观察 动物精子的出现是生物学的一个重要问题之一。动物精子的形态和结构可以作为分类的基础之一。同时, 海洋动物精子的细微结构变化和鞭毛运动性的变异可以作为监测海洋环境污染的指标。软体动物双壳类精子超微结构及精子发生, 国外已有较多的研究, 国内近年来也做了一些工作。西施舌 (Coelomactra antiquata) 俗称“海蚌”, 其足部肌肉发达, 滋味鲜美, 为海产中之珍品。有关西施舌生活史和性腺周期等已有报道, 但其精子发生过程和精子的超微结构研究, 迄今国内外未见报道。本文应用透射电镜研究其精子发生和成熟精子的超微结构, 为更好地进行人工育苗提供理论依据。 1 lhp-型超导体切片 西施舌于2000年5月-6月其繁殖季节购自福州市和平市场。将活体西施舌迅速解剖取出精巢组织, 用3%戊二醛-1.5%多聚甲醛液于4℃固定几天, 充分漂洗后, 再用1%锇酸-1.5%亚铁氰化钾液固定1.5 h, 漂洗;铀块染, 乙醇-丙酮梯度脱水, 环氧树脂618包埋。LKB-Ⅴ型超薄切片机切片, 切片用醋酸铀柠檬酸铅双重染色;日立Hu-12A透射电镜观察与摄影。 2 生殖鞣胞的排列 西施舌的精巢属滤泡型, 精子的发生不同步, 可见从生殖上皮向管腔中央排列着从精原细胞到成熟精子的不同发育阶段的各级生殖细胞 (图版Ⅰ-1) 。 2.1 高尔基体核型 这类细胞数目较少, 位于滤泡壁四周的基底膜上。早期的胞体呈长条状, 长径约为6.5 μm, 紧贴基底膜, 短径约为2.5 μm。细胞核大, 其形状与胞体一致, 大小约为 4.5 μm×1.8 μm, 核膜清晰, 核周腔明显。异染色质少, 凝集成小块状附在核内膜及不均匀分散在核质中。细胞质较少, 电子密度较低。线粒体较少, 散布于细胞的两端, 嵴稀短, 基质电子密度低。内质网较小, 呈囊泡或小管状, 但未见高尔基体等细胞器 (图版Ⅰ-2) 。早期精原细胞经一次有丝分裂, 细胞形状变为近似方形, 仍与基底膜结合, 内质网稍增大变长, 异染色质形态与早期精原细胞一样 (图版Ⅰ-3) 。 2.2 异染色质核近圆形核 精原细胞转化生长成为初级精母细胞。胞体近方形, 大小为2.5~3.5 μm×4~5 μm。核近椭圆形, 核内异染色质增多, 呈块状分布。胞质电子密度增高, 较多较小的线粒体分布在细胞核四周, 线粒体嵴稍增长增多 (图版Ⅰ-4) 。 2.3 基性型精母细胞 由初级精母细胞经第一次成熟分裂形成, 这时期常见核分裂为二, 而胞质未分开的现象, 形成双核细胞 (图版Ⅰ-5) 。细胞呈椭圆形, 大小约为3 μm×5 μm。核也呈椭圆形, 大小约为2.5 μm×3 μm, 呈块状的异染色质比初级精母细胞稍大些, 且部分连在一起。胞质电子致密度较高。线粒体逐渐移至细胞的一端, 并相互融合, 数目开始减少 (图版Ⅰ-6) 。高尔基体发育较好, 呈数层扁平囊状或环状, 其附近或周围分泌有一些嗜锇的大小约0.08 μm×0.1 μm的高尔基液泡。这些较高电子密度颗粒状液泡将成为前顶体颗粒并有相互融合的趋势 (图版Ⅰ-7) 。 2.4 电子致密度的发育 由次级精母细胞经第二次成熟分裂产生, 体积小, 根据发育过程中形态和结构的变化, 可分为6个时期。 精细胞Ⅰ期: 胞体呈长椭圆形, 大小约为3.2 μm×2 μm。核形与胞体一致, 大小为2.8 μm×1.8 μm, 异染色质浓缩呈较大的块状。线粒体逐渐融合, 数目减少, 体积增大。前顶体颗粒继续融合发育形成囊状的前顶体囊, 内含电子密度中等的均匀絮状物。前顶体囊与线粒体共同分布于细胞的一端 (图版Ⅰ-8) 。 精细胞Ⅱ期: 胞体呈圆形或椭圆形, 大小约为2.8 μm×2.5 μm。核呈扁圆形, 长约1.2 μm、宽约1.8 μm, 位于细胞的中央。核内细颗粒状的染色质浓缩呈粗块, 并大部分连成片, 电子致密度明显增大。细胞质含量较多, 电子密度较低。线粒体逐渐移至核的后端, 相互融合, 最终剩下4个大的线粒体形成中段。线粒体呈圆形或椭圆形, 嵴较长且密集。同时中心体也往核后端移至线粒体之间。两个中心粒相互垂直排列, 一个横切面为椭圆形, 另一个为短棒状, 并发出尾鞭 (图版Ⅱ-1) 。前顶体囊不断增大, 逐渐迁移至核的前端, 呈椭圆形, 宽约1 μm、长约0.7 μm (图版Ⅱ-2) 。 精细胞Ⅲ期: 细胞形状大小与Ⅱ期相似 。核变得较圆, 长约1.2 μm、宽约1.4 μm。异染色质进一步浓缩, 呈粗颗粒状。前顶体囊临核面中央先内凹, 形成浅锥状的亚顶体腔, 内含密度较低的均匀物质。然后, 前顶体囊的内含物开始逐渐沉积于前顶体囊基部的四周, 呈现为高密度的均质物, 其它区域仍含有一些密度较低的未沉积内含物 (图版Ⅱ-