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卵巢早衰患者血清抗苗勒管激素的表达及意义
卵巢功能的减少是不可逆转的。一些卵巢早衰 (POF) 患者核型正常,病因不明,称之为特发性POF。以血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、抑制素B (INHB)水平预测POF患者卵巢储备存在局限性。最近研究表明,血清抗苗勒管激素 (AMH) 能更精确地反映卵巢存在的卵泡。通过分析POF患者血清AMH水平与卵巢组织学特征的关系及卵巢AMH免疫学表达,探讨AMH评价POF患者存留卵泡及受孕的可能性,同时探讨卵巢功能紊乱的可能机制。
方法:1997—2005年进行活检且核型正常、无化疗及骨盆放疗史的48例POF患者纳入试验,其中35例冻存有活检日血清标本以供AMH的检测,40例保留有活检组织以供免疫组化检测AMH的表达,28例同时具有以上两个标本。用ELISA法测定血清AMH水平,免疫组化法分析卵巢AMH的表达。10例卵巢功能正常者作为对照。
结果:患者特征:48例特发性POF患者为缺乏性征或仅有部分性征发育的原发闭经或继发闭经,平均AMH水平为(1.04±1.66)μg/L血清AMH正常水平为(2.2-6.8)μg/L。POF组血清水平和卵巢组织学特征 (n=35) :17例(48.6%)产后检标本完全缺乏卵泡,其中12例 (70.6%) 测不到血清AMH水平,3例(17.6%)低于正常水平,2例 (11.8%) 在正常范围内:18例活检标本可见至少1个卵泡的存在,包括11例不超过5个卵泡,其中7例 (63.6%) 测不到血清AMH值,3例 (27.3%) 低于正常值,1例 (9.1%) 在正常范围内;7例(20%)有多于15个卵泡,其中1例(14.2%)测不到血清AMH值,3例 (42.9%) 低于正常水平,3例(42.9%)在正常范围;血清AMH值与年龄不相关。对照组 (n=10) :具有扁平颗粒细胞的原始卵泡无AMH的表达,具有柱状颗粒细胞的初级卵泡可见免疫染色,转化阶段卵泡及窦卵泡强表达,闭锁卵泡颗粒细胞无表达。POF组 (n=40) :分为2组,一组 (n=26) 未见卵泡结构,免疫染色均未见AMH表达:另一组 (n=14) 存在各个阶段的卵泡结构,AMH表达与正常卵巢组织基本相似,但窦卵泡组织学表现及AMH免疫染色与正常组比较有异常:一些卵泡膜、颗粒细胞黄素化,胞质有空泡,但没有闭锁迹象的窦卵泡,仅局部表达AMH蛋白;大部分窦卵泡呈现闭锁迹象。POF患者血清AMH、免疫染色与卵巢表型的关系:卵泡少于5个的患者,仅有5例 (23%) 可测到血清AMH, 1/3可见AMH免疫染色;而卵泡多于15个的患者均可测到血清AMH,并均可见免疫染色;而卵巢无卵泡者测不到血清AMH,且见免疫染色。
讨论:POF患者血清中测不到AMH或低于正常值,仅有少量患者在正常范围内,这与卵巢内存留的卵泡数有关。POF患者窦前卵泡颗粒细胞AMH的表达与正常卵巢相同,说明POF卵巢发育中的颗粒细胞具有功能,能够产生AMH。POF患者窦卵泡异常(闭锁或早黄素化),AMH表达水平低于正常卵巢。闭锁所致AMH表达下降,可能与颗粒细胞凋亡有关;POF患者持续高促性腺激素水平,尤其高黄体生成激素(LH),卵泡不适宜的黄素化,导致AMH仅在局部表达。但很难解释为什么POF患者窦卵泡部分闭锁,而部分早黄素化。
总之,POF患者卵巢窦卵泡表达AMH下降,说明POF窦卵泡尤其是颗粒细胞的缺陷。AMH能够辨别POF患者卵巢是否存留有卵泡,并评价其潜在的排卵和受孕。
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