《规模化肉牛场牛轮状病毒病诊断与防治技 术规程》.pdfVIP

ICS ICS 01.040.65 CCS B 04 TB 团 体 标 准 T/ NAIA×××-×××× 规模化肉牛场牛轮状病毒病诊断与防治技 术规程 Technical regulations for diagnosis, prevention and treatment of Bovine rotavirus disease in large-scale beef cattle farms (征求意见稿) ××××- ××- ××发布 ××××- ××- ××实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 发布 规模化肉牛场牛轮状病毒病诊断与防治技术规程 1 范围 本文件规定了规模化肉牛场牛轮状病毒病诊断与防治技术的术语和定义、诊断、预防和治疗。 本文件适用于规模肉牛场牛轮状病毒病的防治。其他肉牛场参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 16568 奶牛场卫生规范 NY/T 5049 无公害食品 奶牛饲养管理准则 NY 5047 无公害食品 奶牛饲养兽医防疫准则 NY 5030 无公害农产品 兽药使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 牛轮状病毒病 Bovine rotavirus 是指由牛轮状病毒引发犊牛精神沉郁、厌食、呕吐、腹泻、脱水为主要特征的急性胃肠道传染 病。 4 诊断 4.1 流行病学 牛轮状病毒多发于 7 日龄以内的犊牛。病牛和带毒牛是感染性腹泻的主要传染源。通过消化道、 呼吸道、接触、胎盘和交配等途径传播。本病一年四季均可发生，尤以气候多变、寒冷季节和环境 卫生较差时多发。 4.2 临床症状 犊牛感染后 12 h～24 h 出现严重腹泻，发病突然，病初表现为精神不振、厌食和腹泻，体温正 常或 略高，排黄白色稀便，有时带有黏液和血液。病程长者脱水明显，严重者常有死亡。成年牛 多呈隐性感染，并在一定时间持续向外界排毒。 4.3 病理变化 2 牛轮状病毒感染病理变化主要表现在消化肠道，肠腔内充满凝乳块和乳汁，小肠肠壁变薄、半 透明，肠内容物呈液状、灰黄或灰黑色。 4.4 结果判断 出现4.1 、4.2 、4.3 ，可判定为牛轮状病毒病疑似病例。 5 实验室诊断 5.1 主要仪器设备 电镜、低温高速离心机、倒置显微镜、CO2 细胞培养箱、PCR 仪、电泳仪、凝胶成像仪。 5.2 主要试剂 PBS 、2%磷钨酸、胰酶、MA104 细胞、PCR Taq 酶。 5.3 样品采集 5.3.1 粪便样品 将棉拭子伸入肛门内刮取新鲜粪便，放入装有 3 mL PBS 采样管中；也可无菌采集地上刚排出 新鲜粪便。编号并记录相关信息。 5.3.2 组织样品 取病死牛肠道及内容物、肝、脾、淋巴结等，置于无菌密封袋或采样杯内。 5.4 样品处理 对于粪便样品，放入盛有 3 mL PBS 管中，充分振荡，12000 r/min 4 ℃离心 5 min～8 min ，取 上清备用；对于组织样品，称取 1 g 置于研钵，充分研磨后加 5 mL PBS ，混匀，8000 r/min 4 ℃离 心 5 min ，取上清备用。将上清于 0.22 µm 滤器过滤，-80 ℃冰箱保存或直