《规模化羊场多动物链球菌病诊断与防治技 术规程》.pdfVIP

ICS ICS 01.040.65 CCS B 04 TB 团 体 标 准 T/ NAIA×××-×××× 规模化羊场多动物链球菌病诊断与防治技 术规程 Technical procedures for diagnosis and prevention of multi-animal streptococcal disease in large-scale sheep farms (征求意见稿) ××××- ××- ××发布 ××××- ××- ××实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 发布 规模化羊场多动物链球菌病诊断与防治技术规程 1 范围 本文件规定了规模化羊场多动物链球菌病诊断与防治技术的术语和定义、诊断、预防和治疗。 本文件适用于规模羊场多动物链球菌病的防治。其他羊场参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 多动物链球菌病（Streptococcus pluranimalium ）：是指由多动物链球菌引发羊的一种呈现多种 临床表现的传染病。 4 试剂与材料 4.1 试剂配制 4.1.1 5%脱纤维羊血培养基：豆粉琼脂培养基 38.0 g 溶解于 950 mL 蒸馏水中,121 ℃高压灭菌 20 min,冷至 50-55 ℃时无菌操作加入 50 mL 预温至 37 ℃ 的无菌脱纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿，4 ℃ 保存。 4.1.2 5%脱纤维羊血的 MH 琼脂培养基：牛肉粉 6.0 g ，可溶性淀粉 1.5 g ，酸水解酪蛋白 17.5 g ， 琼脂 17.0 g 溶解于 950 mL 蒸馏水中,121 ℃高压灭菌 20 min,冷至 50-55 ℃时无菌操作加入 50 mL 预 温至 37 ℃ 的无菌脱纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿，4 ℃保存。。 5 仪器与设备 5.1 CO2恒温培养箱。 5.2 酒精灯。 5.3 载玻片。 5.4 盖玻片。 2 5.5 草酸铵结晶紫。 5.6 碘液。 5.7 95%乙醇。 5.8 番红染色液。 5.9 显微镜。 6 诊断 6.1 流行病学调查 多动物链球菌可造成牛、羊、马、犬、羊驼等多种动物、多个组织器官感染。长途运输、饲养 环境变化、气候变化等因素可诱发多动物链球菌病的发生。可通过呼吸道和消化道等途径传播。 6.2 临床症状诊断 肺炎型：体温升高、四肢乏力、行动困难、呼吸急促、咳嗽。 6.3 病理变化诊断 全身多处可见水泡，肺组织肿胀，表面淤血、出血。 6.4 病原检查 6.4.1 样本采集 肺炎型：按照GB/T 14926执行。如果24 h 内不能送达实验室，-20 ℃保存。样品解冻时，置于38 ℃～40 ℃水浴解冻。 6.4.2 分离培养操作方法 将采集的肺脏组织表面消毒后，剪取肺脏深部组织一小块，然后无菌操作条件下接种于脱纤维 羊血固体培养基，置于37 ℃ 、5 % CO 恒温培养箱中培养24 h后，无菌操作条件下挑取单菌落接种 2 在新的5%脱纤维羊血固体培养基上，5% CO 培养箱37 ℃培养24 h后，观察菌落形态，并挑取单菌