小麦抗肺病分子标记研究进展.docx

小麦抗肺病分子标记研究进展 小麦粉是由真菌（erisiprirci）引起的一种真菌疾病，也是世界上小麦疾病之一。20世纪70年代后期以来,随着小麦栽培水平的不断提高、种植密度的增加和水肥条件的改善,中国小麦白粉病的危害由局部向全国扩展蔓延,成为小麦生产的严重威胁。特别是20世纪80年代以来,含单一抗病基因Pm8品种的大面积种植,使得病菌群体变异加快,大部分生产品种的抗性丧失,造成了小麦白粉病连续几次大流行。日益严重的环境污染等生态问题迫使人们从化学防治转向筛选和培育抗病品种这条更为经济、安全、有效的途径,而抗性基因的遗传定位则是抗病育种的基础研究工作。 通过寻找与抗病基因紧密连锁的分子标记对基因进行定位,不仅能够识别抗病基因的异同,而且有利于把多个基因聚合到同一个品种中,从而提高抗病品种的使用年限。更为重要的是,能够在分子水平上对抗病基因进行鉴定和评价,为分子标记辅助育种奠定基础。 1 抗白酒基因的同源群 近年来,小麦抗白粉病基因定位研究获得较大进展。自从Sears利用中国春端体把抗白粉病基因Pm1定位在7AL上以来,至今已有33个位点共51个小麦抗白粉病基因定位在3个染色体组的部分同源群中如表1: 除已定名的Pm基因外,还报道了一些尚未明确的抗白粉病基因:来自粗山羊草的Pm Y201位于5DL染色体上;抗德国白粉菌2号小种的小麦品种Abo.Aristide.Courtot中含有Mlar基因;在小麦品种RF714中含有一个新的隐性抗白粉病基因Mlre等。 2 小麦抗白霉基因的分子标记和分子标记的辅助育种 2.1 dna扩增方案 随着分子生物学的发展,分子标记技术已成为抗病研究中不可或缺的手段之一。在小麦抗白粉病基因定位中,常用的DNA分子标记有RFLP(restriction fragment length polymorphism,限制性片段长度多态性),RAPD(randomly amplified polymorphic DNA,随机扩增多态性DNA),AFLP(amplified fragment length polymorphism,扩增片段长度多态性),SSR(simple sequence repeats,简单重复序列),SCAR(sequence characterized amplified region,特异序列扩增区域标记),STS(sequence-tagged sites,序列标志位点)等。另外,一些新型标记如RGAP(Resistance gene analog polymorphism,利用抗病基因保守序列设计的引物)也已经被应用到小麦抗白粉病基因的分子标记中。 目前,在已命名的33个抗白粉病基因中,有22个基因、28个等位基因已经使用分子标记技术进行了基因定位(表1)。 2.2 分子标记辅助育种 在育种工作中,通过与某基因紧密连锁的分子标记来判断目标基因的有无,对目标基因进行选择,培育作物新品种称作分子标记辅助育种。由于可在发育早期进行选择,且不受环境因素及其它基因效应的干扰,大大减少了育种过程中杂交的盲目性,结果也比较可靠。此外还可增加寻找有益基因重组体的机会,从而达到加快育种进程、提高育种效率的目的。 刘金元等利用国外筛选到的与抗白粉病基因Pm2及Pm4a紧密连锁的RFLP标记,分析国内育成的小麦抗白粉病材料,发现即使在不同的遗传背景下,这些RFLP标记仍可用于对Pm2及Pm4a的鉴定,并利用这些标记对Pm2及Pm4a进行了转育;王立新等用与未知的抗白粉病连锁距离为13c M的RAPD标记UBC405,对“京花1号”ד复壮30”的F2代单株进行了分子标记辅助选择,选择效率高达80.3%。 由于RFLP技术复杂及使用同位素、RAPD稳定性较差等缺点,因此都不适合应用大规模的分子标记辅助选择育种。PCR标记具有操作简单、价格低廉和准确性高等特点,成为分子标记辅助育种的最佳选择。刘志勇等将与Pm21连锁的RAPD标记OPH171400转化为SCAR1265和SCAR1400,用于滚动式加代回交转育中Pm21的检测,获得许多具有优良农艺性状的抗白粉病品系;王俊美等用Ma Z Q报导的与Pm4a连锁的STS引物4G+4I对Chancellor和含Pm4a的Khapli/8*Cc杂交的168个F2后代单株进行了PCR分析,进一步证实STS470标记与Pm4a完全连锁,在分子辅助育种中能起到重要的作用。 近年来,一些育种单位借助分子标记技术将多个小麦抗白粉病基因转育到同一品种中去,取得了显著的成果。高安礼等利用与小麦抗白粉病基因Pm2、Pm4a和Pm21紧密连锁的PCR标记,对含有Pm2,Pm4a和Pm21的小麦品系复合杂交后代经3轮分子标记选择,得到了一批聚合含有Pm2、Pm4a和Pm21基因的抗