防风有效部位的药理作用研究.docx

防风有效部位的药理作用研究 风之风可解表风，胜湿止痉挛。用于感冒、头痛、风湿痹痛、破伤风等。现代药理学研究发现,防风除具有解热、镇痛抗炎免疫作用,据报道,防风及防风提取物还具有一定的活血化瘀作用。我们对防风有效部位进行了相关方面的药理实验,观察防风有效部位抗炎、抗凝血和对血液流变学指标的影响。 1 材料表面 1.1 动物其制备 ICR小鼠,雄性,体重20～22g;Wistar大鼠,雄性,体重230～250g,试验动物均为清洁级,由北京维通利华实验动物有限公司提供,动物合格证号:SCXK(京2002-0003)。 1.2 防风苷类提取物的制备 防风为伞形科植物防风Saposhnikovia divaricata(Turcz.) Schischk.的干燥根。防风有效部位的提取方法:药材粗粉,以50%乙醇渗漉提取,渗漉液减压浓缩至无醇味后,上D101大孔树脂,分别以H2O,50%乙醇,95%乙醇洗脱,收集50%乙醇洗脱部位,回收溶剂,得到防风苷类提取物,提取率56%。具主要为香豆素及色原酮苷类成分。分别为:防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷(3.71%),防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷(3.26%),防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷(0.91%),防风色原酮Ⅰ(2.17%)。防风有效部位为棕色粉末,易溶于水,用蒸馏水配成所需浓度备用。 试剂:0.6%醋酸(HAc)生理盐水溶液,0.5%伊文思兰生理盐水溶液,凝血酶原时间(PT)测定试剂盒,批号N95,纤维蛋白原含量(FIB)测定试剂盒,批号132002(以上两种试剂均由上海太阳生物技术公司提供)。 1.3 血小板聚集检测仪器 LXJ-II医用离心机(上海医用仪器厂),Humalyzer 2000半自动生化分析仪(德国产),DIC PA-3210血小板聚集仪(日产),LBY-NW1毛细管黏度计,LBY-N6A自清洗旋转式黏度计,PRECILC2000-4血凝仪(北京普利生仪器公司),RH-120高速微量毛细管离心机(日产)。 2 方法 2.1 灌胃给药和定期给药 小鼠40只随机分成四组,分别为对照组,防风有效部位小剂量组(75mg/kg),中剂量组(150mg/kg),大剂量组(300mg/kg)。灌胃给药0.2mL/10g体重,对照组给等体积蒸馏水。每日给药1次连续给药7d。第八天药后30min由尾静脉注射0.5%伊文思兰生理盐水溶液0.1mL/10g体重,随即由腹腔注射0.6%HAc 0.2mL/只。20min后脱颈椎处死动物。腹腔注射生理盐水溶液5mL,轻揉数下,剪开腹腔用吸管吸出洗涤液,3000r/min离心15min,取上清液于590nm比色测定,再用标准曲线换算出每只小鼠腹腔渗入伊文思兰。 2.2 富血小板血浆prp和ppp的制备 大鼠40只随机分成四组,分别为对照组.防风有效部位小剂量(75mg/kg),中剂量组(150mg/kg),大剂量组(300mg/kg)。灌喂给药1mL/100g体重,每日一次,连续给药7d,对照组给等体积蒸馏水。7d后由腹主动脉采血,针管内吸入枸橼酸钠抗凝(1∶9)。用于测定红细胞压积和全血黏度,部分血液经1000r/min离心10min制备富血小板血浆(PRP),取出少量备用。剩余血浆再经3000r/min离心15min制备贫血小板血浆(PPP)。将PRP与PPP按一定比例混合,用血小板聚集仪调至透光度在4000左右,测定由ADP诱导的血小板聚集。部分血浆用于测定血浆黏度,同时测定纤维蛋白原(FIB)含量和凝血酶原时间(PT)。 2.3 统计方法 实验数据处理均以xˉ±sxˉ±s表示,用组间t检验进行统计比较。 3 结果 3.1 小鼠肠道细菌透皮吸收异常对hac所致小鼠脏器毛细管未来粉量的影响 结果见表1。防风有效部位大剂量组能较明显抑制HAc所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进(P0.05),小剂量和中剂量也有一定作用,但无统计学意义。 3.2 防风固沙对血浆黏度的影响 结果见表2～4。表2结果显示,防风有效部位各剂量对大鼠红细胞压积和全血黏度无明显影响。 表3结果显示,防风有效部位各剂量组对纤维蛋白原含量无明显影响,但防风有效部位大剂量组有降低血浆黏度的作用,与对照组比较差异显著。 表4结果显示:防风有效部位中剂量组和大剂量组有延长大鼠凝血酶原时间作用(P0.05),同时防风有效部位中剂量和大剂量组还能有效地抑制由ADP诱导的血小板聚集。 4 防风有效部位 实验结果提示,防风有效部位对小鼠腹腔注射醋酸所引起的腹腔毛细血管通透性增高炎症模型有一定的抑制作用,其中以大剂量明显。血液流变学指标测定结果显示,无论高切变率下还是低切变率下防风有效部位对全血黏度均无明显作用。由于全血黏度是反映血液流动性和黏滞性的重要指标,因此,全血黏度增高往往导致循环减慢以及组织氧饱和程度的降低。同时,高、