动物细胞工程课件.pptxVIP

;第一节 动物细胞工程的产生和发展 ;1859年，法国解剖学家Vulpian最早尝试将蛙(Rana)胚尾部组织切下，放到普通水中“培养”，观察到组织的生长和分化现象； 1903年，Jolly用盖片悬滴法将蝾螈(Ambystoma maculatum)白细胞培养了将近一个月。 1906年，Beebe和Ewing用动物血清作培养基，将狗(Canis familiaris)淋巴肉瘤细胞培养2h，并观察到细胞生长现象。 1907年，Harrison在无菌条件下，从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养，开创了动物组织培养的先河。;细胞培养技术方面： 1923年，Carrel设计了卡氏培养瓶。Carrel把外科手术的无菌操作观念带到了细胞体外培养实验中，在解决细胞培养的营养和污染方面作出了贡献。 1953年，Gey等以人的肿瘤组织为材料成功地建立了HeLa细胞系。;在细胞融合方面： 1954年，Enders等人观察到麻疹病毒能使离体培养的宿主细胞产生多核体； 1958年，Okada发现紫外线灭活的仙台病毒可引起艾氏腹水瘤细胞彼此融合。 1965年，Harris成功诱导了不同种动物体细胞的融合，并能存活下去。 由于仙合病毒能够稳定地诱发细胞融合而引起了很多科学家的兴趣。;在克隆技术方面： 1892年，Driesch把海胆(Strongylocentrotus perpuratus)2细胞胚胎通过剧烈振荡分成2个细胞进行单独培养，发现每一个分裂球都能够发育成个体较小的完整幼虫。 1933年，Conklin以振荡方法研究2细胞和4细胞期文昌鱼胚胎分裂球的发育能力，发现沿第一次分裂面分开的左右两部分能形成2个完整幼体。 20世纪40~50年代，童第周等在鱼类上进行了相似研究，获得了孪生小鱼。;在多倍体诱导技术方面： 1939年，Fankhauser和Griffiths在两栖类中成功诱导出三倍体。 1945年，Swardson采用低温处理白鲑(Salmo)受精卵，获得三倍体囊胚。 真正诱导三倍体鱼类成功的是Swarup，他用低温处理三棘刺鱼(Gasterosteus platessa)获得了三倍体，并饲养至性成熟。;迅速发展期;迅速发展期;迅速发展期;迅速发展期;迅速发展期;迅速发展期;迅速发展期;第一节 动物细胞工程的产生和发展 ;第二节 动物细胞工程的主要技术领域 ;一、细胞培养 ;二、细胞融合 ;三、细胞拆合 ;四、哺乳动物胚胎培养和胚胎移植 ;六、哺乳动物克隆技术 ;七、组织工程;?组织工程包括三个组成部分：一是提供细胞附着的细胞外间质；二是提供细胞的应答信号；三是触发组织形成的调节信号。;第一节 动物细胞工程的产生和发展 ;第三节 国内动物细胞工程的研究现状 ;1、单克隆抗体;马传染性贫血 猪瘟 鸡新城疫 草鱼出血病等;在家畜胚胎移植技术方面，中国科学院遗传研究所以及其它农业科研机构等单位已取得了一些成果。山东省农业科学院在兔胚移植研究方面已初获成功。西北农业大学研究生张涌（1987），中国农业科学院朱裕鼎领导的课题组（1987年）利用胚胎切割技术繁殖半胚绵羊获得成功。;;特别值得提及的是，中科院生殖生物学国家重点实验室以陈大元为首的课题组，1999年将熊猫体细胞核植入家兔的去核卵中，移核卵在体外培养中发育到胚泡阶段。 熊猫属食肉目动物，家兔属兔形目，如此远缘核质杂交体能发育到囊胚，在世界上尚属首例。 此项研究成果被中国科学院院士评选为1999年中国十大科技成果之一。;转基因动物技术被应用于动物育种，我国已获得生长激素的转基因猪200余头，转基因猪的生长水平高20%。 上海医学遗传研究所利用生物反应器技术获得40头乳腺特异表达外源基因的转基因羊，首批转基因羊乳汁中分泌生长激素的含量已达400mg/L。 中科院发育所和江苏省生物工程重点实验室已建成在乳腺中高效表达促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)转基因山羊50头。;从20世纪80年代开始，一批学者又致力于胚胎干细胞(embryonic stem cell, ES cell)的研究，中科院上海细胞所丛笑倩等以及中南大学湘雅医学院人类生殖工程研究室卢光琇等在这方面作了大量工作并已建立了自己的ES细胞系；中科院发育所郑瑞珍以及北京大学生命科学学院尚克刚等都在ES细胞的分离培养方面作出了杰出的贡献。;在动物细胞培养方面，我国的研究成果丰硕。建国以来，迄今已建立了100多个细胞株和系，为生物学和医学基础研究提供了大量的宝贵材料。;从目前情况来看，我国在动物细胞工程研究领域已建成了许多基地，各种技术门类已初步建立，有些领域已经跨入了国际先进行列。今后的主要任务是向研究的深度发展，把基础研究搞上去，提高研究水平。;;随着1997年2月Natu