gc-ms联用技术在薄荷和薄荷顶空气体提取中的应用.docxVIP

gc-ms联用技术在薄荷和薄荷顶空气体提取中的应用 薄荷是嘴唇科的一种植物，具有散风、清热、皮疹等功能。用于风热感冒,风温初起,头痛。薄荷广泛分布于北半球的温带地区,全世界约有30种左右,我国有12种,其中6种为野生种。现代药理学研究发现:薄荷具有发汗解热,镇静镇痛,抗炎抗菌,利胆保肝等作用。目前其挥发油的提取与成分分析多采用水蒸气蒸馏提取,用气相色谱/质谱联用仪进行分析。而顶空技术具有操作简单,无需有机溶剂等优点。本文采用传统的水蒸气蒸馏法与顶空色谱法提取薄荷挥发性成分,并用气质联用仪对得到的提取物进行了成分比较分析,以探讨理想的薄荷挥发性成分的分析方法。 1 仪器、药品和仪器 Agilent6890/5975B型气-质联用分析仪,G1701DAD.03.00.611工作站,G1888顶空自动进样器(美国Agilent公司),NIST05标准质谱检索库。高速万能粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)。药材于2007年9月21日采于江苏省东台市新曹镇,经南京中医药大学陈建伟教授鉴定为唇形科植物薄荷(Mentha haplocalyx Briq.)的干燥地上部分。丙酮等化学试剂均为分析纯。 2 测试方法 2.1 挥发油含量测定 将薄荷药材切成约5~8mm的短段,取100 g,加水600 m L,按《中国药典》2005版一部附录ⅩD挥发油测定法保持微沸3 h,收集所得挥发油,密封于冰箱保存,得率1.24%。取所提挥发油,加入适量无水硫酸钠,振摇,静置,吸取上清液得无水挥发油适量,置10 m L量瓶中,加丙酮溶解并稀释至刻度摇匀。 2.2 种粉碎的制备 将薄荷药材切成约5~8 mm的短段,用高速万能粉碎机粉碎,过40目筛后,装于具塞三角烧瓶中密闭保存,备用。薄荷药材粉碎过40目筛,10 m L顶空装样瓶,装供试品1.2 g。 2.3 进样口温度 色谱柱:HP-5MS(5%苯甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱,150 m×0.25 mm,0.25μm);进样口温度:200℃;载气:氦气,流速1 m L·min-1;分流比:20︰1;程序升温:初始50℃,维持6 min;3℃/min升至70℃,维持20 min;5℃/min升至180℃,维持6 min。 2.4 扫描温度及扫描范围 电离方式:EI离子源,电子能量70e V;离子源温度:230℃,四级杆温度:150℃,接口温度:280℃;扫描范围:45-1 000 aum;电子倍增器电压:1 342 V。 2.5 加标回复突变实验 柱箱温度:100℃,定量管温度:115℃,传输线温度:130℃;样品瓶平衡时间:30 min,样品瓶加压时间:0.15 min,定量环填充时间:0.15 min,定量环平衡时间:0.05 min,进样时间:1 min。 3 种方法相对含量的比较 3.1采用上述实验方法,对水蒸气蒸馏法所提薄荷挥发性成分及顶空加热所提取的挥发性成分进行了GC-MS测定,得到其总离子流色谱图,见图1,图2。 3.2经标准质谱检索库进行检索,鉴定出薄荷挥发性成分中的主要化学成分,并用面积归一法确定各组分相对含量,检测结果见表1。 3.3由测定结果可以看出,两种提取薄荷挥发性成分的方法无论在成分还是其相对含量均存在一定差异,但主要组分均为薄荷醇和顺式-5-甲基-2-(1-甲乙基)-环己酮,对应的薄荷醇的相对含量分别为82.271%和75.006%,顺式-5-甲基-2-(1-甲乙基)-环己酮的相对含量分别为2.376%和5.274%。 水蒸气蒸馏法存在有效成分易被破坏,提取时间过长等缺点。而顶空分析法用于鉴定中药材,与水蒸气蒸馏法相比不难发现,顶空分析法用于分析时,样品只需稍微粉碎,直接装入样品瓶中,加热平衡即可取样测定,大大减少了样品预处理的繁琐操作,具有简便、快速、准确的优点,可广泛用于含挥发性成分中药材的研究。