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ImageJ软件分析免疫组化图片OD值步骤
免疫组化图片分析应该以OD值分析，背景纯白OD值接近0，DAB着色越深OD值越大，物质的量越多。
免疫组化图片在对于比较不同组间物质的量的多少可能会出现以下三种情况：
1、DAB着色一样深，表达面积大的含量多（AB）：
2、DAB表达面积一样大，着色深的含量多（AB）：
3、前两种情况实际情况中不常见。一般情况下，着色深的表达范围小，表达范围大的着色浅，该如何比较？
将图片上各点的光密度值累加起来，得到IOD。此值与目标物质的总量成正比。IOD值除以目标分布区域的面积，得到AverageDensity（AverageOpticalDensity，AOD），此值反映了目标物质的单位面积浓度。对样品照片进行数字图像分析比较时，就是比较它们之间的平均光密度值的大小。
步骤即为：
打开图片，Image，type，8-bit将图片转换为灰度图片。
将8-bit灰度图片转换为OD值：Analyze，Calibrate，选择UncalibrateOD即可校准。
选择需要测量的参数：在ImageJ软件Analyze下选择SetMeasurements设置测量参数，选择Integrateddensity，Area，Limittothreshold（Image-Adjust-Threshold调节阈值，红色代表选中，选择Limittothreshold只计算红色选择的面积），点击OK。
Image-Adjust-Threshold调节阈值，选择所有阳性信号（红色代表选中）：
Analyze，Measure（快捷键Ctrl+M），得到结果：
即该图片的平均光密度值为0.46。
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