柱凝集法交叉配血试验操作规程2024.pdfVIP

柱凝集法交叉配血试验操作规程2024

1．原理

柱凝集法交叉配血是通过抗原－抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过

预先装填有抗IgG的凝胶柱。凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或

柱体中，而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。

2试剂

柱凝集配血卡。

3．操作

3.1取凝胶抗球蛋白微柱卡，标记1号（“主侧”)，2号（“次侧”)。

3.2主侧：配制细胞悬液，通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者

红细胞配成1％的悬液（根据厂商的操作说明书而定）50µ1轻轻滴人1号微

管反应池中，再25µ1受血者血清。

3.3次侧：配制细胞悬液，通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者

红细胞配成1％的悬液（根据厂商的操作说明书而定）50µ1轻轻滴人2号微

管反应池中，再25µ1献血者血清。

3.4阴印捆：配制细胞悬液，通常情况下使用供应商提供的稀释液将受

血者红细胞配成1％的悬液50µ1轻轻滴入2号微管反应池中再25µ1AB

型血清。

3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°C孵育15分钟。

3.6取出凝胶卡，立即用专用离心机离心，通常离心的速度被设定在

1000r/min(80xg~100xg离心10分钟后，观察结果。

4结果判定

4.1若对照管细胞沉淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。

结果判断参照图示（见图1-5-1).

图片

4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。

4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。

5注意事项

5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时，向反应池内要先

加红细胞悬液，后加血清或抗体。

5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同，一般

50µ11％红细胞悬浮加25µ1血清；50µ10.8％红细胞悬浮加40µ1血清。

5.3除上述两种配血方法之外，常用的还有快速的聚凝胺介质配血、LISS

介质配血以及增强反应的酶法配血等。这些方法具有一些局限性，通常用

千特殊情况下的配血。

柱凝集法能对微弱的抗原或抗体进行反应，大大提高了试验的敏感度，便

、标准化，重复性好，结果稳定，结果观察直观。但孵育、离心

于自动化

时间较长，不适用千特别紧急的配血。

考文献(1]尚红，王毓三，申子瑜全国临床检验操作规程（第4版）［M].

北京：人民卫生出版社，2019.