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菊粉对金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎的保护作用及机制研究

奶牛乳腺炎是危害奶业发展的头号疾病，可造成乳产量和乳品质显著降低并

危害奶牛生产性能，从而每年在世界范围内造成巨大的经济损失。金黄色葡菌球

菌（Staphylococcusaureus,S.aureus）是诱发奶牛乳腺炎的最主要病原菌之一，

由于其胞内寄生、免疫逃逸等特点，导致S.aureus一旦入侵乳腺就很难被清除，

从而造成奶牛乳腺炎的持续性发生。目前临床上针对S.aureus性乳腺炎的治疗

仍然以抗生素为主，但由于许多抗生素难以进入胞内，使得该方法疗效不佳且容

易引发细菌耐药和药物残留，危害食品安全和人类健康。近年来的研究表明，宿

主免疫状态对于抵抗病原感染和炎症反应至关重要，因此，通过调控机体免疫来

抑制S.aureus感染可能是缓解S.aureus诱导奶牛乳腺炎的潜在途径。肠道菌群

作为机体重要的组成成分，在肠道和诸如脑、肝、肺和乳腺等肠道外远端器官疾

病中均发挥重要作用。课题组前期研究发现，肠道菌群可以通过调节乳腺与病原

菌互作从而影响奶牛乳腺炎的发生发展，并且调节肠道菌群是防治乳腺炎的有效

途径。大量文献报道更是表明，肠道菌群可调控机体免疫稳态，因此，靶向肠道

菌群调控宿主免疫应答或许是未来防治奶牛乳腺炎的一个重要措施。膳食纤维是

肠道菌群产生短链脂肪酸（Shortchainfattyacid,SCFA）的重要前体物质，其可

增加肠道菌群的丰度及肠腔中SCFA的水平，从而维持肠道稳态和调节宿主免疫。

作为经典的膳食纤维，菊粉（Inulin,IN）已被证明可调节肠道菌群及SCFA的产

生并影响疾病进程，但其是否有助于缓解病原诱导的乳腺炎尚不清楚。因此，本

文拟探究菊粉对S.aureus诱导的小鼠乳腺炎的保护作用及其潜在机制。

首先，给小鼠饲喂菊粉后乳腺感染S.aureus建立乳腺炎模型，探究菊粉对肠

道菌群和S.aureus诱导小鼠乳腺炎的影响。结果发现，菊粉可以显著降低乳腺

S.aureus载量，缓解乳腺组织病理损伤、降低炎性细胞因子TNF-α和IL-1β浓

度，并增加乳腺中紧密连接（TJ）蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-3的表达。此

外，16SrRNA测序结果显示，菊粉能够改变小鼠肠道菌群的多样性、结构和功

能，主要表现为增加拟杆菌门等SCFA产生菌的丰度，降低变形菌门等肠道有害

菌的丰度。这些结果表明，菊粉显著改变肠道菌群组成，并缓解S.aureus诱导的

I

小鼠乳腺炎。

其次，通过给饲喂菊粉的小鼠补充抗生素（ABX）清除肠道菌群，随后乳腺

感染S.aureus建立乳腺炎模型，探究菊粉是否通过调节肠道菌群影响乳腺炎。结

果发现，清除肠道菌群抑制了菊粉对S.aureus感染导致的小鼠乳腺组织病理性

损伤、炎性细胞因子的产生以及血乳屏障渗透性增加的保护作用。随后，将对照

及菊粉组粪便微生物移植给ABX清除肠道菌群的小鼠，16SrRNA测序发现，与

移植对照小鼠粪便微生物（CF）组相比，移植菊粉小鼠粪便微生物（HIF）的小

鼠肠道内SCFA产生菌丰度显著增加，变形菌门等致病菌丰度降低。同时，HIF

能够显著降低S.aureus诱导小鼠的乳腺组织炎症反应和血乳屏障渗透性的增加。

以上结果表明，菊粉对S.aureus性乳腺炎的保护作用依赖于肠道菌群。

最后，为了探究菊粉缓解S.aureus诱导小鼠乳腺炎的潜在机制，通过靶向代

谢组学检测发现，菊粉显著增加小鼠粪便中乙酸、丙酸和丁酸的浓度。并且，补

充丙酸和丁酸可以明显缓解S.aureus诱导的乳腺炎症和血乳屏障渗透性的增加。

通过对不同组小鼠的巨噬细胞检测发现，丁酸和丙酸能够显著降低巨噬细胞内S.

aureus载量、增加抗菌肽相关基因的表达，并且菊粉饲喂及粪便微生物移植（FMT）

小鼠巨噬细胞抗菌反应增强，并依赖于肠道菌群。机制上，丁酸和丙酸抑制组蛋

白脱乙酰化酶3（HDAC3）的表达，而使用HDAC3的特异性抑制剂RGFP966

可产生类似抗菌效应。以上结果表明，菊粉通过肠道菌群代谢产生丁酸，抑制

HDAC3活性，激活巨噬细胞中的抗菌免疫，从而缓解S.