中药化学生物碱类化学成分的提取分离技术.ppt

四、生物碱的鉴定（一）沉淀反应1.沉淀试剂金属盐类碘-碘化钾（Wagner）KI-I2棕褐色，红棕色沉淀碘化铋钾（Dragendoff）BiI3?KI黄色到橘红色沉淀碘化汞钾（Mayer试剂）HgI2?2KI类白色沉淀若加过量试剂，沉淀又被溶解。1.沉淀试剂硅钨酸(Bertrand试剂)SiO2?12WO3类白色沉淀苦味酸(Hager试剂)2,4,6-三硝基苯酚黄色沉淀雷氏铵盐(Ammoniumreineckate)硫氰酸铬铵试剂，与季铵型生物碱反应生成红色沉淀或结晶。四、生物碱的鉴定（一）沉淀反应2.沉淀反应条件（1）通常在酸性水溶液中生物碱成盐状态下进行；（若在碱性条件下则试剂本身将产生沉淀）（2）在稀醇或脂溶性溶液中时，含水量50%；（当醇含量50%时可使沉淀溶解）（3）沉淀试剂不易加入多量。（如：过量的碘化汞钾可使产生的沉淀溶解）四、生物碱的鉴定（一）沉淀反应3.结果的判断（1）鉴别时每种Alk需采用三种以上沉淀试剂；（沉淀试剂对各种Alk的灵敏度不同）（2）直接对中药酸提液进行沉淀反应，则阳性结果，不能判定Alk的存在阴性结果可判断无Alk存在。氨基酸、蛋白质、多糖、鞣质等+沉淀试剂——沉淀四、生物碱的鉴定（一）沉淀反应（1）矾酸铵-浓硫酸溶液（Mandelin试剂）为1%矾酸铵的浓硫酸溶液。如遇阿托品显红色，可待因显蓝色，士的宁显紫色到红色。（2）钼酸铵-浓硫酸溶液（Frohde试剂）为1%钼酸钠或钼酸铵的浓硫酸溶液，如遇乌头碱显黄棕色，小檗碱显棕绿色，阿托品不显色。（3）甲醛-浓硫酸试剂（Marquis试剂）为30%甲醛溶液0.2ml与10ml浓硫酸的混合溶液。如遇吗啡显橙色至紫色，可待因显红色至黄棕色。四、生物碱的鉴定（二）显色反应1、薄层色谱吸附剂：硅胶、氧化铝展开剂：以苯、氯仿为主显色剂：改良碘化铋钾因硅胶为弱酸性，因此需加碱处理：1）在湿法铺板时加一定量的NaOH溶液，使板呈碱性。2）在中性展开剂中加入一定量的二乙胺或氨水（如氯仿-二乙胺9﹕5或9﹕1）3）在层析槽中放一盛有氨水的小杯。四、生物碱的鉴定（三）色谱检识2、纸色谱固定相：水、甲酰胺、酸性缓冲液3、高效液相色谱四、生物碱的鉴定（三）色谱检识一、提取（一）总生物碱的提取

植物中生物碱的性质和存在状态决定提取方法。常用提取方法：※水蒸气蒸馏法：用于具有挥发性的生物碱，如麻黄碱及液体生物碱。※升华法：用于具有升华性的生物碱，如咖啡因。※溶剂法：用于大多数生物碱。

主要介绍溶剂提取法第二节生物碱的提取和分离1.水或酸水提取法

原理：①利用生物碱盐易溶于水，难溶或不溶于亲脂性有机溶剂的溶解性能，用水进行提取。

②用酸水提取可使生物碱都以盐的形式被提出，提高提取率。

常用的酸：0.5％～1％的乙酸、硫酸、盐酸或酒石酸等。

提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法。

此方法的缺点是提取液体积大，浓缩困难，水溶性杂质多。

2.醇类溶剂提取法

原理：游离生物碱及其盐一般都能溶于乙醇和甲醇。

提取方法：浸渍法、渗漉法、加热回流（连续回流）提取法。

此方法的缺点是含有大量脂溶性杂质。

3.亲脂性有机溶剂提取法原理：利用游离生物碱易溶于低极性有机溶剂，进行提取。

提取方法：冷浸法、加热回流（连续回流）提取法。

此方法的特点是①提取前需用碱碱化。

②只能提取亲脂性生物碱，亲水性生物碱不被提出。

③杂质少，易于进一步纯化。

④毒性大，易燃易爆。（二）水溶性生物碱碱的提取1、沉淀法2、溶剂法二、分离（一）总生物碱的初步分离（二）生物碱单体的分离1、利用生物碱碱性的差异进行分离即在不同pH条件下进行分离——pH梯度法，有两种操作：

方法1

总生物碱/酸水溶解

│

│用碱调节PH由低到高

│每调一次用氯仿萃取一次

┌────┬───┴───┬─────┐