酶工程第十节酶与现代生命科学.pptVIP

?第二活性在次理想条件下,一些限制性内切酶的特异型会被降低,只有部分正常识别位置被识别,此称为第二活性（SecondaryActivity），也称星号活性（StarActivity），加以“*”表示，如EcoRI*。酶的第二活性将引起底物DNA链上切口增多，酶解片断变小，造成特异性降低。例：理想条件下（PH=7.5）EcoRIG?AATTC次理想条件下（PH=8.5）EcoRI*?AATT次理想条件：通常包括不适合的离子强度、过高的PH、二价金属离子的替换、较高的甘油浓度等。第30页，课件共51页，创作于2023年2月?限制酶的保质期一般是在检定日以后的一年内，但几乎所有的限制酶在超过保质期后都不会急剧失活,因此购入后即使是经过长时间保存的酶,也完全可以使用，但这些酶在使用前最好再测一次活性。另外，保存酶时即便让其冻结，大部分酶也不会急剧失活。第31页，课件共51页，创作于2023年2月EcoRI第32页，课件共51页，创作于2023年2月PstI第33页，课件共51页，创作于2023年2月SmaIreturn第34页，课件共51页，创作于2023年2月研究酶的理化性质及其作用原理，对于阐明生命现象的本质和规律具有十分重要的意义（包括酶的结构功能、酶与代谢调节、酶与生物的生长、发育、进化、疾病等）。从酶分子水平去探讨酶与生命活动、与代谢调节、与疾病、生长发育等等的关系，对阐明某些生命活动的本质和规律，无疑也具有十分重要的意义。二、酶是生命科学研究的重要对象第35页，课件共51页，创作于2023年2月?同功酶同工酶(isoenzyme)是指催化的化学反应相同，而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶,存在于生物的同一种属或同一个体的不同组织、甚至同一组织或细胞中。目前已发现有150多种酶具有同工酶，如6-磷酸葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、酸性和碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶、肌酸磷酸激酶、核糖核酸酶、过氧化酶和胆碱酯酶等。其中，发现最早，研究最多的是乳酸脱氢酶（LDH）同工酶.第36页，课件共51页，创作于2023年2月例：LDH同工酶的两种亚基以不同比例组成五种四聚体：LDH1(H4)、LDH2(H3M)、LDH3(H2M2)、LDH4(HM3)和LDH5(M4)。DogfishLDHM4结构图第37页，课件共51页，创作于2023年2月

同功酶与物种进化?同工酶是生物进化过程中为适应愈趋复杂的代谢而引起的一种分子进化，以适应不同组织或不同细胞器在代谢上的不同需要.?同功酶在各器官和组织中的分布不同。这样就可以根据同工酶酶谱差异并配合其它方法从分子水平探讨物种进化、遗传变异等一些生命现象。第38页，课件共51页，创作于2023年2月在正常情况下血清中同功酶谱是相对稳定的。当某一组织或器官发生病变时，就有某种特殊的同工酶释放出来，引起血清中同功酶活性的改变。对病人及正常人同工酶电泳图谱进行比较，有助于上述器官疾病的诊断。在临床上已应用同工酶做诊断指标,例如:冠心病及冠状动脉血栓引起的心肌受损者血清中LDH(H4)及LDH2(MH3)含量增高;而肝细胞受损患者血清中LDH5(M4)增高。第39页，课件共51页，创作于2023年2月同功酶与其它同工酶的研究不仅在临床血液病、肿瘤及其它疾病的诊断方面占有重要地位，而且在分子遗传学、物种鉴定、法庭取证、亲子鉴定、优生优育等领域中也具有广阔的应用前景。第40页，课件共51页，创作于2023年2月?肿瘤的酶异常肿瘤酶异常原因：1、肿瘤过多或过少产生酶2、肿瘤阻塞了酶通过的导管系统3、肿瘤诱导酶产生4、细胞通透性改变使可溶性酶进入血液循环第41页，课件共51页，创作于2023年2月临床诊断还没有单一指标可确诊癌，所以酶测定可作为一种辅助手段，如：测定血清淀粉酶——胰腺癌酸性磷酸酶——前列腺癌亮氨酸氨肽酶、硫酸酯酶、乳酸脱氢酶等同工酶谱变化———肝癌、结肠癌、直肠癌。第42页，课件共51页，创作于2023年2月第1页，课件共51页，创作于2023年2月一、酶是分子生物学研究的重要工具