SN∕T 5126-2019 鲑鱼及其加工产品中转基因成分定性PCR检测方法.pdf

ICS65.150

B41

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T5126-2019

蛙鱼及其加工产品中转基因成分定性

PCR检测方法

Methodofpolymerasechainreactionfordetectinggeneticallymodifiedsalmons

andtheirderivedproducts

2019-09-03发布2020-03-01实施

中华人民共和国海关总署发布

SN/T5126-2019

目。吕

本标准依照GB/T1.1-2009约州的规则起草。

本标准由中华人民共和l国海关总署提出并归口。

本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和因上海海关、中华人民共和困黄埔海关c

本标准主要起草人：王勤、刘晓飞、王慧惺、李霆、林祥梅、付伟、李想、刘二龙、黄文肝、李院琳、仇松寅、

刘丹丹、梅琳。

SN/T5126-2019

蛙鱼及其加工产品中转基因成分定性

PCR检测方法

1范围

本标准规定了大西洋佳AAS及其产品巾转基国成分荧光PCR检测方法。

木标准适J+I＋）.：.西洋娃AAS及其产品中转基因成分（GH-AFP）的定性检测。

2规范性引用文件

下列文件对于水文件的耐用是必不叫少的。凡是注日期的引用文件，仪所注日期的版本适用于本

文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GU/T274032008实验室质量控制规范食品分子生物学检测

GU/T19495.3-2004转基因产品检测核酸提取纯化方法

3缩略语

下列缩Pl备语适用于本文件。

AAS转基因大西洋娃（AquAdvantageSalmon)

GH生长激素（growthhormone)

AFP抗冻蛋白（antifreezeprotein)

4操作方法

4.1主要仪器

4.1.1荧光PCR仪

4.1.2超净工作台

4.1.3台式冷冻离心机

4.1.4涡旋振荡器

4.1.5恒温水浴锅

4.1.6-80℃冰箱或液氮罐

4.2主要试剂

除特别说明以外．所用试剂均为分析纯，实验用水为双蒸水。

4.2.1蛋白酶K

4.2.2乙酸饵

4.2.3兰氯甲皖：异戊晖，24:1

4.2.4盼：三氯甲炕z异戊晖，25:21:1

1

SN/T5126-2019

4.2.5十二炕基磺酸铀（SOS)

4.2.6TE缓冲液

4.2.7乙晖

4.2.8冰乙酸

4.2.9氧氧化饵

4.2.10探针法制混掖（2×）

4.3冒｜物和探针

召｜物和探针序列见表1，扩增参考序列见附录Ao

表1检测转基因蛙鱼外源基因所需的引物及探针序列

被检测基因引物序列探计序列备注

上游zγC八TCTCC八GGGTTCGGTTTCC3’TCCG八GC八GC八八八GCC

GHAFP