《食用油中苯并[a]芘的测定酶联免疫吸附定量法》征求意见稿.pdf

T/CCOAXXXX—XXXX

食用油中苯并[а]芘的测定

酶联免疫吸附定量法

1范围

本文件规定了酶联免疫吸附定量法测定食用油中苯并[а]芘的原理、试剂、仪器、试样

制备、分析步骤、结果计算和精密度等。

本文件适用于大豆油、菜籽油、花生油等食用油中苯并[а]芘的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期

的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括

所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T5524动植物油脂扦样

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

本方法采用免疫竞争法原理。试样经正己烷稀释，分子印迹小柱提取并净化，浓缩至干，

甲醇溶解并稀释后通过酶联免疫吸附定量法测定，利用抗原抗体特异性结合的免疫反应对苯

并[а]芘含量进行测定。

5试剂和材料

除非另有说明，本方法所用的试剂均为分析纯，试剂配制用水为GB/T6682规定的二级

水。

5.1试剂

5.1.1甲苯（CH）：色谱纯。

78

5.1.2乙腈（CHN）：色谱纯。

23

5.1.3二氯甲烷（CHCl）：色谱纯。

22

5.1.4正己烷（CH）：色谱纯。

614

5.1.5甲醇（CHOH）：色谱纯。

3

5.1.6样本稀释液：由酶联免疫吸附定量检测试剂盒配套提供，或根据产品说明书配制。

2

T/CCOAXXXX—XXXX

5.2标准品

苯并[a]芘标准物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，

纯度不小于99.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

表1苯并[a]芘标准物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量

中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量

[а]

苯并芘Benzo(a)pyrene50-32-8CH252.32

2012

警示——苯并[a]芘是一种已知的致癌物质，测定时应特别注意安全防护！测定应在通

风柜中进行并戴手套，尽量减少暴露。如已污染了皮肤，应采用10%次氯酸钠水溶液浸泡和

洗刷，在紫外光下观察皮肤上有无蓝紫色斑点。

5.3标准溶液配制

5.3.1苯并[a]芘标准储备液(100 μg/mL)：准确称取苯并[a]芘标准品1 mg（精确到0.01 mg）

于10 mL容量瓶中，用甲苯溶解，定容。溶液转移至试剂瓶中后，在－20 ℃下避光保存，

保存期1年。

5.3.2苯并[a]芘标准中间液(1.0 μg/mL)：吸取100 μL苯并[a]芘标准储备液(100 μg/mL)，

用乙腈定容到100 mL。此溶液密封后避光－20 ℃下保存，3个月有效。

5.3.3苯并[a]芘标准工作液：把苯并[a]芘标准中间液（1.0 μg/mL）用甲醇稀释得到浓度为

0.2μg/mL,0.6μg/mL,1.8μg/mL,5.4μg/mL,16.2μg/mL的标准品，临用现配。

5.4材料

5.4.1苯并[a]芘分子印迹柱：500 mg，6 mL。使用前依次用7 mL二氯甲烷及6 mL正已烷活

化。

5.4.2苯并[a]芘酶联免疫吸附定量检测试剂盒：需冷藏储存，具体储存条件参照使用说明

书。

6仪器

6.1