NY_T 4430-2023 香石竹斑驳病毒的检测 荧光定量PCR法.docxVIP

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CCS?B?04

备案号：XXXX-XXXX

中华人民共和国农业行业标准

ＮＹ?／?Ｔ?4430—2023

香石竹斑驳病毒的检测

荧光定量PCR法

Detection?of?carnation?mottle?virus—Real-time?fluorescent?PCR?method

2024??05??01?实施2023?－?12?－

2024??05??01?实施

－??－

中华人民共和国农业农村部 发布

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前言

本文件按照?GB/T１??１—２０２０?标准化工作导则??第?１?部?分:标?准?化?文?件?的?结?构?和?起?草?规?则?的?规?定

起草.

请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.

本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口.

本文件主要起草单位:云南省农业科学院花卉研究所、云南农业大学、中国农业大学、云南云科花卉有

限公司、玉溪云星生物科技有限公司、国家观赏园艺工程技术研究中心、农业?农?村?部?花?卉?产?品?质?量?监?督?检

验测试中心(昆明)、云南省花卉育种重点实验室、云南省花卉工程技术研究中?心、云?南?省?花?卉?标?准?化?技?术

委员会、昆明市花卉遗传改良重点实验室.

本文件主要起草人:瞿素萍、张艺萍、刘冠泽、王丽?花、王?继?华、杨?秀?梅、高?俊?平、杨?春?梅、许?凤、张?丽?芳、

马男、苏艳、邹凌、蒋亚莲、单芹丽、莫锡君.

Ⅰ

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香石竹斑驳病毒的检测荧光定量?PCR?法

１范围

c i l??i CD本文件规定了香石竹斑驳病毒(arnatonmot?evr

c i l??i C

D

本文件适用于香石竹(ianthuscaryophylus)栽培品种的种苗、植?株?及?其?他?组?织?中?香?石?竹?斑?驳?病?毒

的检测和判定.

２规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,

仅该日期对应的版?本?适?用?于?本?文?件;不?注?日?期?的?引?用?文?件,其?最?新?版?本?(包?括?所?有?的?修?改?单?)适?用?于?本

文件.

GB/T６６８２分析实验室用水规格和试验方法

３术语和定义

下列术语和定义适用于本文件.

３??１

e外壳蛋白基因coatprotingene

e

编码病毒外壳蛋白的基因,可作为病毒检测的靶标,简称cp?基因.

３??２

TaqMan探针TaqManprobes

３一种检测寡核苷酸的荧光探针,其５′末端携带荧光基团(如?FAM、TET、VIC、HEX?等),′端携带淬

３

B灭基团(如?TAMRA、?HQ?等).

B

４缩略语

下列缩略语适用于本文件.

C i l??iCarMV:香石竹斑驳病毒(

C i l??i

c?lCt?值:每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数(

c?l

deDEPC:焦炭酸二乙酯(i

de

d l???i idNTPs:脱?氧?核?苷?三?磷?酸?混?合?液?(eoxynuceosdetrphosphate?mixture),由?４?种?脱?氧?核?糖

d l???i i

d d i i

d d

i ip

PCR:聚合酶链式反应(olymerasechanreacton)

i ti???h aTrs:三(羟甲基)

i ti???h a

５香石竹斑驳病毒的基本信息

r香石竹斑驳病毒属番?茄?丛?矮?病?毒?科?(Tombusviidae)麝?香?石?竹?斑?驳?病?毒?属?(Carmovius)典?型?成?员.

r

详细信息见附录?A.

６原理

利用香石竹斑驳病毒?CP?基因的高度保守区域的一段１３０bp序列设计实时荧光引物和探针,根据香

石竹斑驳病毒的实时荧光?PCR?检测结果对香石竹斑驳病毒进行检测鉴定.

７仪器和设备

７??１实时荧光定量?PCR?仪.

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