分子生物学分子生物学 (61).pdf

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liangetal.JournalofExperimentalClinicalCancerResearch2012,31:64

/content/31/1/64

RESEARCHOpenAccess

Constructionofarecombinanteukaryotic

expressionvectorcontainingPHD3geneandits

expressioninHepG2cells

1*†2†1113

Qi-LianLiang,Zhou-YuLi,YuanZhou,Qiu-LongLiu,Wen-TingOuandZhi-GangHuang

Abstract

Prolylhydroxylasedomain3(PHD3)isahypoxiainduciblefactor-α(HIFα)regulator;itdegradesHIFαinthe

presenceofoxygen.Recently,therehavebeenanincreasingnumberofstudiesabouttheroleofPHD3in

proliferationandapoptosisofcancercells.However,mostoftheevidencefortheroleofPHD3isobservational,

andlittleisknownofthemolecularmechanism.Inourcurrentstudy,weconstructedarecombinanteukaryotic

expressionvectorcontainingthePHD3geneanddetecteditsbiologicalactivityinhumanhepatomacellline

(HepG2cells).WesuccessfullyconstructedarecombinantpcDNA3.1(+)-PHD3plasmid;theresultsshowedthat

PHD3overexpressioncouldinhibittheproliferationofHepG2cellsandinduceapoptosisbyactivatingcaspase-3

activity.OurstudyhasprovidedpreliminarymaterialsanddataforfurtherinvestigationoftheeffectofPHD3on

HepG2cells.

Keywords:Prolylhydroxylasedomain3(PHD3),Hepatocellularcancer(HCC),Hypoxiainduciblefactor(HIF),

Caspase-3

Introductionappearstoinduceapoptosisincancercells[11-13].How-

Therearethreeprolylhydroxylasedomainproteinsever,mostofthesestudiesareobservational,andknow-

(PHDs),PHD1,PHD2andPHD3,thatarethekeyre-ledgeofPHD3’smolecularmec

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