抗广谱耐药细菌的放线菌筛选及抗菌活性研究.docxVIP

.1229.中国抗生素杂志2023年11月第48

.1229.

文章编号：1001-8689(2023)11-1229-13

微生物药物筛选

微生物药物筛选

抗广谱耐药细菌的放线菌筛选及抗菌活性研究

罗健雅1,2黄紫贝1,2赵以恒1,2郭鑫1,2李蒙1,2苏思元1,2李自盼1,2徐昀眺1,2王海燕3刘文博1,2,*(1扬州大学兽医学院传染病教研室，扬州225009；2江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009；

3江苏农牧科技职业学院，泰州225300)

摘要：目的筛选对多重耐药菌具有广谱抗性的放线菌，发掘新型抗生素，为人类和动物细菌性疾病防控提供物质储备。方法采集江苏省部分地区土壤样品20份，稀释涂布于改良高氏一号固体培养基进行分离纯化，Chelex-100法提取放线菌基因组DNA，PCR测定16SrRNA基因序列，确定菌属。应用垂直条纹法检测放线菌对标准菌株和临床多重耐药分离菌株的抗菌效果；PCR检测放线菌抗菌活性和抗生素合成基因之间是否存在相关性；筛选抗菌活性最强的放线菌，检测不同时间抗菌物质释放量，测定临床分离病原菌的抗菌谱；基于16SrRNA基因确定其系统进化关系；对抑菌活性最好的放线菌进行基因组测序，应用antiSMASH在线工具分析次级代谢产物生物合成基因簇，预测其产生新颖次级代谢产物的潜力。结果从20份土壤样品中分离纯化237株放线菌，分布于放线菌纲的10个目13个科19个属，优势菌属为链霉菌属，占分离总数的57.8%；抗生素合成基因检测实验表明放线菌的抗菌作用与抗生素合成基因的存在可能呈正相关；抗菌活性最强的链霉菌命名为Y94，在第七天产生具有抗菌活性的次级代谢产物最多；Y94产生的次级代谢产物对临床分离的238株不同种属的病原菌均有良好的抗菌效果；对Y94进行系统发育分析，结果表明其与甲酸链霉菌(Streptomycesformicae)1H-GS9的相似度为95.83%，可能为潜在新种；Y94全基因组中有多种抗生素相关的次级代谢产物基因簇，有巨大的生物合成潜能。结论链霉菌Y94株具有抗多重耐药菌活性，可能属于1个新的种属，其抗菌活性物质可能是1种新的物质，具有潜在的开发价值。

关键词：土壤；放线菌；多重耐药菌；抗菌活性；抗生素合成基因；全基因组

中图分类号：R978.1文献标志码：A

ScreeningandantibacterialactivityofActinomycetesagainstbroad-spectrumdrug-resistantbacteria

LuoJianya1,2,HuangZibei1,2,ZhaoYiheng1,2,GuoXin1,2,LiMeng1,2,SuSiyuan1,2,LiZipan1,2,XuYuntiao1,2,WangHaiyan3,andLiuWenbo1,2

(1CollegeofVeterinaryMedicine,YangzhouUniversity,Yangzhou225009;2JiangsuCo-innovationCenterforPrevention

andControlofImportantAnimalInfectiousDiseasesandZoonoses,YangzhouUniversity,Yangzhou225009;

3JiangsuVocationalCollegeofAgriculturalandAnimalHusbandry,Taizhou225300)

AbstractObjectiveScreeningofpositiveactinomycetalstrainswithbroad-spectrumresistancetomultidrug-

收稿日期：2022-12-01

基金项目：江苏高校优势学科建设工程资助项目(No.PAPD)；江苏现代农业(水禽)产业技术体系(No.JATS[2021])；江苏省农业科技自主创新资金项目(No.CX(20)2012)

作者简介：罗健雅，女，生于1996年，在读硕士研究生，研究方向为动物源细菌耐药性研究，E-mail:578864312@

*通信作者，E-mail:lwb@yzu.edu.cn

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