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河南理工大学本科毕业设计（论文）开题报告

题目名称学生姓名

选题的目的和意义：

怀山药根际土壤酶活性测定

专业班级 学号

土壤中所进行的生物和生物化学过程是陆地生态系统功能的基础，这些过程之所以能够持续进行，得益于土壤中酶的作用。酶是土壤生态系统代谢的一类重要动力，土壤中所进行的一切生物学和化学过程都要由酶的催化作用才能完成。

土壤酶是土壤微生物、植物根系和土壤中其他生物细胞产生的胞内酶和胞外酶的总称，其活性反映了土壤中各种生物化学过程的强度和方向，其中土壤过氧化氢酶、蔗糖酶、磷酸酶、脲酶、蛋白酶和多酚氧化酶活性之间的关系及总体活性对评价土壤肥力水平有重要意义。土壤中微生物种类、水气热状况、酸碱度、结构组成、养分丰缺、污染程度及培肥方式等都显著地影响着土壤酶活性，如在土壤表层脲酶活性较高，随着土壤剖面加深而降低；过氧化氢酶活性与作物根系距离越近，活性越小；离作物根系越远，活性越大；保护性耕作与传统耕作方式相比，对土壤的干扰较小，表土中的土壤酶活性较高。试验中，主要是通过根际土壤与非根际土壤酶的比较，研究根际生物对土壤酶活性的影响。

土壤酶主要来源于植物根系和微生物的活动，它参与各种生化反应和物质循环。根际微生物比根际外高得多，当微生物受到外界环境因素刺激时，便不断向外分泌酶，致使根际内外酶差异大。过氧化氢酶促进过氧化氢的分解，有利于防止它对生物体的毒害作用；蛋白酶活性表征根际有机质含量。多酚氧化酶活性表征根际土壤酚类等有毒物质积累。脲酶活性表征氨的供给情况，蔗糖酶活性表征有机质的多少。

二、国内外研究现状简述：

关于土壤酶的研究历史可以追溯到19世纪末Woods发现过氧化氢酶，并指出它来源于植物腐解。Kong、May和Gile曾正式测定过氧化氢酶的活性。1910年Fermi曾检测土壤中的蛋白酶和尚时已知的其它酶。以后脱氨基酶、磷酸酶和脲酶等相继被检测出来。19世纪50年代以后，由于植物和生物化学以及其它学科研究的进步，许多这方面的理论成果及方法等被引入土壤酶学的研究，从而加深了对土壤酶促反应方面的认识，开始应用土壤酶学方面的知识解决现代农业中出现的问题和环境问题。德国的KoepfH、苏联的GalstyanAsh、捷克斯洛伐克的DrobnikJ等对土壤酶的研究均做出了重要的

贡献。一些国家成立了专门的土壤酶研究机构，对于土壤酶的来源、分布，土壤酶在土壤有机质中的转化和肥力形成中的作用及其用作判断土壤熟化程度的指标的可行性等方面进行了大量研究。现在土壤酶的研究已经超越了经典土壤酶学的研究范畴，在几乎所有的生态系统的研究中，土壤酶活性的检测几乎成了必不可少的测定指标。由于土壤酶活性与土壤的理化性质、土壤类型等密切相关，所以土壤酶活性一直以来被作为评价土壤生产力及土壤质量的指标而备受科研工作者的重视。土壤酶来源主要有三种途径：微生物、土壤动物、植物根系和植物残体。

许多微生物能产生胞外酶、在研究米曲霉时发现，各种酶是按一定顺序向介质中释放的。首先是糖酶和磷酸酶，而后是蛋白酶和酯酶，最后是过氧化氢酶、在生长的最初阶段能释放出一些酶；另一些酶则释放较迟，这时菌丝重量降低。但有趣的是在介质中发现的过氧化氢酶是游离态的，是典型的胞内酶。在合成的和自然的介质中，微生物对各类胞外酶的释放，科学工作者也进行了广泛的研究。Phaff在这方面取得了很好的成果。许多细菌和真菌都能释放淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶。Jeuniaux证明了几丁质酶是在链霉菌胞外产生的。Meyer证明了镰刀霉可以释放磷酸酶和酯酶。根系也可以分泌一些酶。Knudson和Smith发现了植物根分泌的淀粉酶；Rogers在玉米和番茄根分泌物中发现磷酸酶，在根中发现土壤核酸酶。

植物残体在分解的过程中也能够向土壤中释放酶，或者在分解的植物细胞组织中保持部分活性。有证据间接表明，提取所有可能来源于植物碎屑的酶很快地被分解，但能够促进土壤中微生物的生长。其它研究发现，当把新鲜玉米的根组织加入到土壤中，土壤呈现磷酸酶活性，但随后迅速降低并呈现蛋白酶活性。加入蒸汽灭菌的根能提高酸性磷酸酶的活性，这意味着对于直接提供土壤酸性磷酸酶，植物残体更多的是刺激微生物对酸性磷酸酶的合成。

土壤动物区系对土壤所提供的酶的数量很少有人研究。Kiss研究了蚯蚓对于转化酶活性的影响，并且指出，在草地和耕作土壤中，特别是在土壤表层，对提高转化酶的活性，蚯蚓的排泄物有重要的作用。Kozlov进一步的研究结果支持了Kiss的结论，即土壤动物确实在某种程度上对土壤酶的含量有作用。

三、毕业设计（论文）所采用的研究方法和手段：1．研究手段：

A、紫外分光光度计测定酶活性：DNS法制定葡萄糖标准曲线，茚三酮法制定甘氨酸标准曲线，邻苯三酚比色法制定重铬酸钾标准曲线。B、高锰酸钾滴定