体细胞染色体配对及巨染色体制片与观察.ppt

一、实验目的掌握剥离果蝇唾液腺及制作巨染色体标本的方法。观察果蝇唾液腺染色体的形态特征，了解体细胞染色体联会现象。二、实验原理果蝇唾液腺染色体是永久性间期染色体，由于间期染色体不螺旋化，且不断地进行复制，但细胞并不进行分裂，这样就使唾液腺染色体变成了巨大的染色体（多线染色体），唾液腺染色体比果蝇的其它体细胞染色体要长100～200倍，体积大上千倍。2.果蝇唾液腺染色体能进行体细胞配对，配对时所有染色体的着丝点聚集在一起形成染色中心。同源染色体的两条臂紧密结合，自由伸展。?果蝇的染色体数为2n=2×4，其中第II、第III染色体为中部着丝粒染色体，第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体，第IV染色体很短为粒状。由于染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起形成染色中心，两对中部着丝粒染色体配对后从染色中心伸出4条染色体臂，一对端着丝粒染色体配对后从染色中心伸出1条染色体臂，而1对很短的粒状染色体配对后整个附着在染色中心上，所以在显微镜下可见一个染色中心和从染色中心处伸出5条染色体臂的特殊图像。果蝇的染色体3.唾液腺染色体上有深浅不同、宽窄不一的带纹，这些带纹的数目和位置是恒定的，代表着种的特征和一些基因的位置。由于这些带纹的存在，染色体上发生缺失、重复、倒位、易位等很容易在唾液腺染色体上识别出来。四、实验用品试剂：卡宝品红染色液、0.7%生理盐水、1Mol/LHCI仪器及器具：解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸等。三、实验材料黑檀体果蝇三龄幼虫五、实验方法与步骤2.唾腺染色体制片（1）取一3龄幼虫，置于载玻片上，加上1滴生理盐水，置解剖镜下.（2）用解剖针压住头部，压点尽可能靠头部口器处。（3）再用镊子夹住尾端，在靠近头部的部位，平稳快速拉断其身体，一对唾腺随之而出。唾腺是一对半透明的香蕉状腺体，小心将腺体上粘附的脂肪体剔除,用滤纸将多余的生理盐水吸去，注意不要碰着腺体，以防吸走。（4）滴1滴1MOL/LHCI，水解1min后，滴加蒸馏水洗3次，吸干水分后，滴1滴卡宝品红染液，染色10min。（5）盖上盖玻片，用一张吸水纸包住盖玻片处，然后平放在桌面，用大拇指压片。（6）显微观察：先在10×镜下调好焦距，再换40×镜下观察，并绘图说明其特征。图片引自郝大翠等《生物学通报》2010,45(4)A.三龄幼虫E.一对唾液腺D.巨染色体D.Kostoff用压片法首先在D.melanogaster果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体（salivaryglandchromosome）。事实上，*首先熟悉幼虫结构，幼虫具一钝尾和带黑色口器的尖头端。*可横向揉几下（注意不要使盖片滑动，且只朝一个方向揉动，不要来回揉！）