生物化学：第三章 核酸化学.ppt

嘌呤碱和嘧啶碱均含有共轭双键，因此，核苷、核苷酸、DNA和RNA在240～290nm范围内均有紫外吸收。最大吸收峰在260nm左右。二、紫外吸收性质∶核酸的紫外吸收性质可以用于鉴定DNA和RNA的纯度，常用A260/A280比值来判断。 纯DNA∶A260/A280=1.8 纯RNA∶A260/A280=2.0若样品的蛋白质含量增加，A260/A280比值怎样变化？增色效应(hyperchromiceffect)∶当核酸变性或降解时，其紫外吸收显著增强，这就是核酸的增色效应。减色效应(hypochromiceffect)∶当变性的核酸在一定条件下恢复其原有的性质时，其紫外吸收的强度又可恢复到原有的水平，这种现象称为减色效应。DNA与RNA的组成区别核酸碱基戊糖DNAA、G、C、T脱氧核糖RNAA、G、C、U核糖第三节核酸的结构一、核酸的一级结构核酸的一级结构是指核苷酸的组成及排列顺序（即碱基序列）。5′端3′端核苷酸之间以3?,5?-磷酸二酯键连接形成多核苷酸链，即核酸。在链的一端的一个戊糖的3′位上OH是游离，另一端的戊糖其5′位上连有一个磷酸基团呈单磷酸酯状态，这两个末端分别称为3′末端及5′末端。CGA3′端DNA一级结构的简写形式核苷酸顺序又称碱基顺序，是蛋白质与RNA结构的生物语言。戊糖3`-OH5`-磷酸PA核苷酸5`3`首端末端PPPPPPAGCTGCOH书写方法二、DNA的二级结构——双螺旋结构RosalindFranklin1962年，Crick、Watson和Wilkins获得诺贝尔奖。（一）DNA双螺旋结构的研究背景碱基组成分析Chargaff规则：[A]=[T][G]=[C]碱基的理化数据分析A-T、G-C以氢键配对较合理DNA的X-线衍射图谱分析（二）DNA双螺旋结构模型要点1.两条链反向平行，围绕同一中心轴构成右手双螺旋(doublehelix)。螺旋直径2nm，表面有大沟和小沟。2.磷酸-脱氧核糖骨架位于螺旋外侧，碱基垂直于螺旋轴而伸入内侧。每圈螺旋含10个碱基对(bp)，螺距为3.4nm。碱基平面与纵轴垂直，糖环平面与纵轴平行3.两条链通过碱基间的氢键相连，A对T有两个氢键，C对G有三个氢键，这种A-T、C-G配对的规律，称为碱基互补规则。4.维持双螺旋稳定的因素：横向为氢键，纵向为碱基间的堆积力。DNA双螺旋结构的多样性Z型DNAB型DNAA型DNA二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装（自学内容）（一）DNA的超螺旋结构超螺旋结构(superhelix或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。正超螺旋(positivesupercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方同相同负超螺旋(negativesupercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方向相反意义DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。（三）DNA在真核生物细胞核内的组装真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是核小体(nucleosome)。核小体的组成DNA：约200bp组蛋白：H1H2A，H2BH3H4串珠状核小体结构串珠状核小体DNA双螺旋片段染色质纤维伸展形染色质片段密集形染色质片段整个染色体DNA的功能DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转录的模板。它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。基因从结构上定义，是指DNA分子中的具有遗传信息的核苷酸序列，其中的核苷酸排列顺序决定了基因的功能。RNA（核糖核酸）∶主要分布在细胞质中，与蛋白质合成密切相关RibosomalRNAs(rRNA，核糖体RNA)占80%以上：与蛋白质构成核糖体，是合成蛋白质的场所MessengerRNAs(mRNA，信使RNA)占5%：合成蛋白质的模板TransferRNAs(tRNA，转运RNA)占15%：在蛋白质合成中运输氨基酸三、RNA的结构RNA分子的基本结构是一条线性的多核苷酸链，由四种核糖核苷酸以3’，5’-磷酸二酯键连接而成。（一）、信使RNA的结构与功能2、其结构模式为∶5’-帽子-5’非编码区-编码区-3’非编码区-3’多聚A1、真核mRNA链翻译产生一条多肽链。5’-帽子结