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中文摘要
基于MOF结构的类过氧化物酶构建及葡萄糖检测研究
金属有机框架(MOF)是一种独特的具有周期性网络结构的多孔纳米材料,
由无机金属元素和有机配体自组装而成。MOF上有丰富的催化位点,其结构和
固有特性赋予了MOF内在酶的活性。以MOF作为前体或者模板可以合成多个
基于MOF的衍生品从而构建出具有高稳定性和催化活性的纳米酶。本文构建出
具有类过氧化物酶活性的MOF(Cu-MOF)并用于固定葡萄糖氧化酶(Glucose
oxidase,GOx),建立了多酶模拟体系,通过多酶级联反应以实现葡萄糖的快速检
测。
本文的研究内容如下:
1、Hemin@Cu-MOF的合成及酶学性质探究:利用1,3,5-苯三甲酸和苯甲酸
的固定配比构造出具有晶体缺陷的MOF,这样能够增大MOF的孔径以便后期
葡萄糖氧化酶的固定,通过红外光谱和扫描电镜等表征手段,证明MOF成功合
成,并且分散性良好,形态稳定。Hemin@Cu-MOF有良好的类辣根过氧化物酶
活性,可以使显色底物TMB显色并在652nm处有吸收峰,在pH=4、35℃条
件下拥有最大酶活。稳态动力学结果显示Hemin@Cu-MOF遵循米氏模型,其催
化机理与天然辣根过氧化物酶一致表现为乒乓机制。
2、Hemin/GOD@Cu-MOF的合成及酶学性质探究:通过物理吸附法合成
Hemin/GOD@Cu-MOF,实验选择浓度为0.4mg/mL的葡萄糖氧化酶溶液,装载
时间选择1.5h,此时葡萄糖氧化酶的装载量为15.6mg/g并达到最大的酶催化反
应速率。Hemin/GOD@Cu-MOF中的葡萄糖氧化酶催化底物葡萄糖产生过氧化氢,
其自身的类辣根过氧化物酶活继续催化底物TMB和过氧化氢反应,在pH=5,
35℃条件下酶活性最大。与天然酶相比,在热稳定性、pH稳定性、离子浓度稳
定性方面我们的纳米酶性质更优。
3、葡萄糖检测:利用Hemin/GOD@Cu-MOF材料进行饮料的检测,实验确
定检测最佳时间为20min,葡萄糖浓度在0.01mg/mL-0.3mg/mL范围内线性良
2
好,线性方程为y=0.7405x+0.1007,R=0.99143,饮料检测效果良好。
关键词:
纳米酶,金属-有机框架,辣根过氧化物酶,葡萄糖氧化酶,葡萄糖检测
Abstract
Constructionofperoxidase-likematerialbasedonMOF
structureandresearchonglucosedetection
Nanozymeisakindofnano-materialwithenzyme-likeactivity.Itnotonlyhas
enzymaticpropertiesbutalsohasexcellentpropertiesofnano-materials,whichhas
beenaresearchhotspotforalongtime.Metalorganicframeworks(MOF)isaunique
porousnano-materialwithaperiodicnetworkstructure,whichisself-assembledby
inorganicmetalelementsandorganicligands.Thereareabundantcatalyticsiteson
MOF,anditsstructureandinherentcharacteristicsendowtheMOFwithintrinsic
enzymeactivity.MultipleMOF-basedderivativescouldbesynthesized
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