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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1961.8—2013
出口食品过敏原成分检测
第8部分:实时荧光PCR方法检测
榛果成分
Detectionofallergencomponentsinfoodforexport—
Part8:RealtimePCRmethodfordetectinghazelnutcomponents
2013-03-01发布2013-09-16实施
国家质量监督检验检疫总局中华人民共和国发布
国家质量监督检验检疫总局
I
SN/T1961.8—2013
前言
SN/T1961《出口食品过敏原成分检测》共分为19部分:——第1部分:酶联免疫法检测花生成分;
——第2部分:实时荧光PCR法检测花生成分;
——第3部分:酶联免疫吸附法检测荞麦蛋白成分; 第4部分:实时荧光PCR方法检测腰果成分;
——第5部分:实时荧光PCR方法检测开心果成分;——第6部分:实时荧光PCR方法检测胡桃成分;
——第7部分:实时荧光PCR方法检测胡萝卜成分;———第8部分:实时荧光PCR方法检测榛果成分;
——第9部分:实时荧光PCR方法检测杏仁成分;
第10部分:实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分; 第11部分:实时荧光PCR方法检测麸质成分:
——第12部分:实时荧光PCR方法检测芝麻成分;
——第13部分:实时荧光PCR方法检测小麦成分;
第14部分:实时荧光PCR方达检测鱼成分;
第15部分:实时荧光PCR方法检测芹菜成分:
——第16部分:实时荧光PCR方法检测芥末成分;
——第17部分:实时荧光PCR方法检测羽扇豆成分;———第18部分:实时荧光PCR方法检测荞麦成分;
——第19部分:实时荧光PCR方法检测大豆成分。本部分为SN/T1961的第8部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局。
本部分主要起草人:张霞、赵良娟、高宏伟、张海英、刘培、张宏伟、高旗利、陈颖、袁飞、吴亚君、郑文杰、吴冬雪。
SN/T1961.8—2013
出口食品过敏原成分检测
第8部分:实时荧光PCR方法检测
榛果成分
1范围
SN/T1961的本部分规定了食品中过敏原榛果成分的实时荧光PCR检测方法。本部分适用于食品及其原料中过敏原榛果成分的定性检测。
本部分所规定方法的最低检出限(LOD)为0.01%(质量分数)。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测
3定义和术语
3.1
3.2
3.3
3.4
下列术语和定义适用于本文件。
过敏原allergen
又称致敏原或变应原,是指能够引起变态反应的抗原。
榛果hazelnut
别名又称山板栗、尖栗、棰子等,属桦木科(Batuladeae)榛属(Coryls)植物。
实时荧光PCRrealtimePCR
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积器实时监控整个PCR扩增过程。
Ct值cyclethreshold
每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。
4方法提要
样品经研磨后,提取DNA,以DNA为模板,采用榛果oleosin基因序列的特异性检测引物和探针进行实时荧光PCR扩增,根据Ct值,判断样品中是否存在过敏原榛果成分。
5试剂和材料
除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂。实验用水应符合GB6682中一级水的规格。所有试剂
2
SN/T1961.8—2013
均用无DNA酶污染的容器分装。
5.1检测用引物(对)序列和探针
榛果成分扩增引物和探针、内参照(真核生物成分)引物和探针详见表1。表1试验用引物和探针
名称
序列(5
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