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中国中医药科技2024年1月第31卷第1期Jan.2024Vol.31No.1·27·

基于DKK3调控探讨藏红花素对Aβ25-35

诱导神经元损伤的保护作用

杨晓佳,吴敏,江萌,刘立权

(杭州市中医院·浙江杭州310007)

摘要目的:探究藏红花素通过调控dickkopfWNT信号通路抑制因子3(Dickkopf3,DKK3)对Aβ25-

35诱导神经细胞损伤的保护作用及机制。方法:Aβ25-35诱导小鼠海马神经细胞系HT22细胞模拟细胞

损伤,CCK8增殖实验检测藏红花素最佳干预浓度。qPCR检测DKK3沉默质粒(DKK3siRNA)以及

DKK3过表达质粒(DKK3-OE)的DKK3mRNA表达,随后进行细胞转染。细胞分为正常组、Aβ25-35

组、Aβ25-35+藏红花素组(1.0μmol/L)、Aβ25-35+DKK3siRNA组、Aβ25-35+siRNA对照组、

DKK3-OE组、空白质粒对照组、DKK3-OE+藏红花素组(1.0μmol/L)组。采用流式细胞数检测细胞

凋亡,Tubulinβ染色观察细胞神经突触形态,Westernblot检测细胞Aβ、DKK3、β-catenin、GSK-3β、p-

GSK-3β、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:0.5~2.0μmol/L藏红花素可显著上调HT22细胞活

力(P0.05)。与正常组相比,Aβ25-35组和DKK3-OE组细胞凋亡显著增加,突触长度、分支数显著

减少,Aβ、DKK3、p-GSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高,β-catenin、Bcl-2蛋白蛋

白表达显著降低(P0.01)。与DKK3-OE组相比,藏红花素干预则能逆转以上结果。与Aβ25-35组

相比,Aβ25-35+藏红花素组和Aβ25-35+DKK3siRNA组细胞的凋亡显著降低,突触长度、分支数显

著增加,Aβ、DKK3、p-GSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax蛋白表达显著降低,β-catenin、Bcl-2蛋白

蛋白表达显著升高(P0.05)。结论:藏红花素对Aβ25-35诱导神经细胞损伤具有保护作用,其作用与

通过抑制DKK3调控GSK-3β/β-catenin信号通路表达有关。

关键词阿尔兹海默症;藏红花素;DKK3;神经元;GSK-3β/β-catenin信号通路;细胞凋亡;体外实验

NeuroprotectiveEffectofCrocinonNeuronDamageInduced

byAβ25-35byMediatingDKK3

YANGXiaojia,WUMin,JIANGMeng,LIULiquan

(HangzhouChineseMedicineHospital,Hangzhou,Zhejian310007)

ABSTRACTObjective:TostudytheneuroprotectiveeffectofCrocinmediatedDickkopf3(DKK3)onneuron

damageinducedbyAβ25-35anditsmechanism.Methods:MousehippocampalneuronHT-22cellswerein-

ducedbyAβ25-35,thenCCK-8testwasusedtodetermineopti