基于氧化应激探讨疏肝补肾法对卵巢早衰大鼠颗粒细胞凋亡的影响.pdfVIP

中医药学报2024年5月第52卷第5期

·30·ActaChineseMedicineandPharmacologyVol.52,No.5,May2024

基于氧化应激探讨疏肝补肾法对卵巢早衰大鼠

颗粒细胞凋亡的影响

1,21,21,2∗

王敏,张斐,王洋

(1.福建中医药大学中医证研究基地,福建福州350122;2.福建中医药大学中医学院,福建福州350122)

摘要目的:探讨疏肝补肾法对卵巢早衰大鼠颗粒细胞凋亡的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机

分为正常组、模型组、柴胡疏肝散合左归饮低剂量组、柴胡疏肝散合左归饮中剂量组、柴胡疏肝散合左归

饮高剂量组、雌激素组,每组8只。除正常组外,其余大鼠腹腔注射环磷酰胺连续15d建立卵巢早衰大

鼠模型,同时采用慢性不可预知温和应激方式建立肝郁证模型,连续21d。造模成功后,柴胡疏肝散合

-1-1-1

左归饮低、中、高剂量组分别灌服柴胡疏肝散合左归饮混悬液3.39g·kg、6.77g·kg、13.55g·kg,

-1

雌激素组灌胃戊酸雌二醇(补佳乐)0.105mg·kg,正常组和模型组灌胃等体积的灭菌水,连续干预3周。

采集阴道脱落细胞监测大鼠动情周期变化,行为学检测肝郁证造模情况,HE染色观察卵巢组织病理学

情况,ELISA法检测血清雌二醇(E)、促卵泡激素(FSH)、抗缪勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)含

2

量,TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡指数,q-PCR和WesternBlot法检测卵巢组织Bcl-2、Bax、活性氧

(ROS)、SOD-2mRNA和蛋白表达量。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢组织结构

不清晰,颗粒细胞层明显变薄,旷场实验移动总距离和蔗糖水消耗率降低(P0.05,P0.01),血清

FSH水平升高,E、AMH、INHB水平显著降低(P0.01),颗粒细胞凋亡指数升高(P0.01),Bcl-2、

2

SOD-2的mRNA和蛋白表达量降低,Bax的mRNA和蛋白表达量升高,ROS的mRNA表达量升高(P

0.05,P0.01)。与模型组相比,各给药组卵巢组织病理形态和行为学实验结果有所改善,血清FSH水

平降低,E、INHB水平升高(P0.05,P0.01),Bax、ROS的mRNA表达水平降低,柴胡疏肝散合左归

2

饮中、高剂量组和雌激素组颗粒细胞凋亡指数降低(P0.01)、Bcl-2蛋白表达水平升高,柴胡疏肝散

合左归饮高剂量组和雌激素组Bax蛋白表达降低、SOD-2和Bcl-2的mRNA和蛋白表达升高(P

0.05,P0.01)。与柴胡疏肝散合左归饮低剂量组相比,中剂量组INHB水平升高,高剂量组FSH降

低、E升高、SOD-2的蛋白表达升高,中、高剂量组颗粒细胞凋亡指数降低(P0.05,P0.01)。与柴2

胡疏肝散合左归饮中剂量组相比,高剂量组E水平升高、Bax的mRNA表达水平降低(P0.05)。结

2

论:疏肝补肾法可能通过减轻氧化应激而降低颗粒细胞凋亡率,进而改善卵巢功能,且以高剂量组作用