正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究.docxVIP

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正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究

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（1.北京中医药大学中药学院制药系100102；2.中国中医科学院中医药科技合作中心100700；

3.北京市崇文区药品检验所100075）

【摘要】目的通过正交试验，优选处方的最佳提取工艺。方法采用水提取方式，以水为溶剂进行提取，选择加水倍数，提取时间，提取次数三个因素，每个因素设计三个水平，因素水平见表1，按照正交实验L9（34）表进行试验。分别以总黄酮作为标志性成分，综合考虑，选定最优提取工艺。结果因素相关性RCRARB，药材的加水量(C)为主要因素。提取的最佳工艺条件为加8倍量水，提取时间为1.5h一次。结论优选得到的提取工艺简单、稳定、可行。

【关键词】正交试验；提取工艺

OrthogonalTestExtractionofprescriptionmedicinesstrongflavorswaistandknee.

[Abstract]ObjectiveToexperiment,thebestextractionoptimizationprescription.MethodsThewaterextractionmethod,waterassolventextraction,multiplechoicewithwater,extractiontimeandnumberofthethreefactors,eachofthethreelevelsofdesign,factorlevelsinTable1,inaccordancewiththeorthogonalL9(34)Tableexperiment.

Respectively,asasymbolofthecompositionoftotalflavonoids,consideringtheselectedoptimalextraction.ResultsFactorsrelatedtoRCRARB,herbsamountofwater(C)asthemainfactor.Theoptimumextractionconditionsfor8timestheamountofwater,extractiontime1.5h,once.ConclusionTheoptimizedextractionprocessissimple,stableandfeasible.

[keywords]Orthogonal;extraction

骨碎补具有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症[1]。其活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道，用水提取和醇提取，提取的活性成分含量相差不多[2]。骨碎补浸膏以水为溶剂时提取效果较好[3]，淫羊藿，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效；黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊藿重要的活性成分。可用水提或乙醇提取[4]。怀牛膝，具有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。甾酮，皂苷，多糖为主要成分。枸杞有清肺、明目、滋肝、补肾之功效，多糖为主要成分。延胡索具有活血化疲，行气止痛功效。五味配伍组方则有补肾，壮腰膝，强筋骨止痛之功效。为了保证制剂质量，用正交设计法研究其最佳提取工艺，分析加水倍数，提取时间，提取次数对总黄酮得率的影响，优选出最佳提取条件。

1仪器和材料

1.1仪器

uv-2800H型紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限公司）。

1.2材料

所有药材均购于北京本草方源药业有限公司。

2方法和结果

2.1样品的制备

按处方投料，加规定量的水，煎煮规定的时间和次数，滤过，滤液浓缩至稠膏，放入真空干燥箱，干燥得干膏作为样品，进行测定。

2.2正交试验设计

选用L9(34)正交试验，结合影响该药材提取效率的主要因素，考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮含量的影响，同时考虑生产实际,选取3个水平，见表1。

2.3总黄酮含量的测定方法

2.3.1对照品溶液制备

精密称取芦丁（批号100080-200707，购于中国药品生物制品鉴定所）5.1mg，加甲醇溶解并定容至100mL，即得0.051mg/mL。

2.3.2标准曲线的制备

吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求得回归方程，Y=31.29X+0.0018R2=0.9997，计算试样中总黄酮含量。

2.3.3供试品溶液的制备

称取一定量的试样(大约0.5g)，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。此液于波长360nm测