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组织工程骨
骨组织工程化方法与研究进展
在人的体内,有一些器官和组织再生增值能力很弱或根本不具备,
创伤与疾病往往会造成这些器官或组织的不可逆损伤。因此,人们希
望用新的、具有生命力的活体组织置换病损组织,以永久性地替代其
形态、结构和功能。组织工程学正是基于这样的目的而建立起来的一
门新兴学科。目前,组织工程学在泌尿道、心血管、肝肾脏重建等方
面都有了一定的进展,这里主要讨论组织工程骨。
骨髓中含有大量的骨前体细胞,在受到一定外界刺激后会分化生
成成骨细胞,因此,一般骨折后机体能够自行修复。然而,过于强大
的外力作用(如高坠、重物碾压等)会导致粉碎性骨折,由此引发的
骨缺失很难自行修复。传统的骨修复通常采用自体骨移植、同种异体
骨移植和植入人工替代材料的方法,然这样易造成其他并发症或排异
反应引起的感染。骨组织工程的目的就是模拟骨折过程中骨修复的自
然过程[1],即在预期部位通过对成骨前体细胞、支架、生物活性物质
等的调控,促进骨组织愈合,使骨能够正常发挥维持机械运动、保护
脏器及维持一定代谢的作用[8]。组织工程骨的主要优势在于其自体细
胞来源所带来的低感染性和低致癌率。临床应用实践证明,生物衍生
组织工程骨有良好的成骨能力,未见明显排斥反应及并发症[2]。
现今骨组织工程的治疗方法主要有三种,分别从组织工程三要素
导入,即支架方法、生长因子方法和细胞方法:
1、支架方法
即体内合成。主要步骤是:先将预先成形的支架植入体内骨缺损
部位,而后内源性成骨前体细胞在体内生长分化成为成骨细胞,支架
则被重塑组织取代最后在体内自行降解。
此方法对于支架材料的选择有很高要求,所选材料须具有多孔的
特性以助于骨的生成,如钛合金纤维、含磷酸三钙和羟基磷灰石的陶
瓷等[1]。这种方法的主要缺点是材料生物活性差,无法用于骨缺损量
较大和供血差的部位。
2、生长因子方法
直接在骨缺损部位使用成骨诱导因子,可用于骨缺损量较大和供
血差的部位。然而据大量可行性试验分析,在灵长类动物中单纯使用
该方法,要达到效果必须大剂量使用骨形成蛋白[3],这会给人体带来
很大的风险。现该方法多与细胞方法结合使用[9],已获得了一定进展,
这一点将在文章的稍后被提到。
3、细胞方法
将骨前体细胞直接移植到骨缺损部位,植入骨髓中所含的大量骨
前体细胞可以导致大量骨的形成。通常从自体髂骨取得骨髓,复合适
当生物材料后植入骨缺损部位。然在临床实践中,由于疾病等原因,
部分患者骨源缺乏,有人通过抽取此类患者少量骨髓分离出其中的人
骨髓间充质干细胞,并在体外对其进行扩增培养并诱导分化后,与自
制的同种异体脱钙骨基质相复合,构建个体化的组织工程骨。通过临
床观察已证实该组织工程骨有良好的生物安全性和成骨效能[6]。
最后讨论一下组织工程骨领域近年来的一个热门话题——组织工
程骨的血管化。内部及周围血管的代谢供养能力对于骨的存活与生长
起着决定性作用,因此在组织工程骨的内部及周围建立完整有效的血
管网十分关键。对于小尺寸组织工程骨的供血主要依靠周围毛细血管,
而大尺寸组织工程骨,特别是长骨的血管化,是目前临床上的一个难
点。学术界对此作了大
量研究,目前主要可归纳为以下三种方法:
1、生长因子促进血管化
血管内皮生长因子在血管再生中起着极为重要的作用,它主要是
以通过促进血管内皮细胞的有丝分裂、增加血管通透性以及增进单核
细胞趋化性的方式促进血管的再生。因此,使用生长因子结合骨髓植
入骨缺损处能提高组织工程骨血管化程度,促进骨生成,从而满足少
量骨髓修补大量缺损的需求。
2、血管内皮细胞应用
血管内皮细胞可以促进组织工程骨修复大段骨缺损时的成骨能力,
加速骨愈合[7]。有人通过对设计的三种促进组织工程骨血管化的方法
的比较,证实材料包裹带血管蒂筋膜及复合血管内皮细胞效果最佳[7]。
因此将血管内皮细胞与种子细胞联合培养与支架形成复合物后植入体
内也是促进组织工程骨血管化的有效方法。
3、基因工程技术
骨组织工程血管化研究中引用基因转染技术,将具有显著成骨及促
血管化作用的细胞因子外源基因通过病毒或非病毒载体导入种子细胞,
使其在细胞的不断增殖分化过程中稳定地表达并发挥良好的促进成骨
和血管化的作用[5],例如有研究表明BMP-2
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