细菌的生理生化反应.ppt

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主要用于厌氧菌的鉴定产气夹膜梭菌卵磷脂酶阳性中间类杆菌脂酶阳性致病性葡萄球菌硷性磷酸酶阳性,如金黄色葡萄球菌等第32页,共38页,星期六,2024年,5月原理:O/129(二氨基喋啶)对弧菌属有抑制作用,而对气单胞菌属无抑制作用培养基:碱性琼脂培养基方法:纸片法药敏40μg/片结果:有抑菌环为敏感,无抑菌环为耐药意义:弧菌、邻单胞菌敏感;气单胞菌属耐药第33页,共38页,星期六,2024年,5月原理:A群链球菌对杆菌肽几乎全敏感,而其他链球菌则耐药培养基:BAP方法:同纸片法药敏0.04U/片结果:>10mm敏感;<10mm耐药意义:A群链球菌敏感第34页,共38页,星期六,2024年,5月原理:肺炎链球菌对Optochin敏感,其他链球菌无抑制作用培养基:BAP方法:同纸片法药敏5μg/片结果:抑菌环直径>14mm敏感;≤14mm耐药此时加做胆汁溶菌试验证实意义:肺炎链球菌对Optochin敏感第35页,共38页,星期六,2024年,5月本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气(变黄);产生硫化氢(变黑)。葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。a.uninoculated

b.littlechange/alkaline/-/-

c.alkaline/acid/-/+

d.acid/acid/+/+

e.acid/acid/+/-第36页,共38页,星期六,2024年,5月沙门氏菌的TSI试验第37页,共38页,星期六,2024年,5月感谢大家观看第38页,共38页,星期六,2024年,5月关于细菌的生理生化反应生化反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。糖酵解试验过氧化氢酶试验淀粉水解试验V-P试验甲基红(MethylRed)试验靛基质(Imdole)试验枸椽酸盐试验:尿素酶(Urease)试验硝酸盐还原试验三糖铁(TSI)琼脂试验动力试验API系列VITEK?全自动化微生物鉴定系统第2页,共38页,星期六,2024年,5月原理:细菌含有发酵糖(醇、苷)的酶分解糖类产酸、产气、或仅产酸。培养基:含有0.5%-1%的糖(醇、苷)的液体、半固体、固体、或微量生化管。方法:纯菌种接种培养基,要求的温度,数小时至两周,微量管注意保持湿润,以免干燥。结果:能分解糖(醇、苷)类产酸时,培养基中的指示剂呈酸性反应。若能产气时,培养基可出现开裂气泡等现象意义:肠杆菌科尤为重要第3页,共38页,星期六,2024年,5月根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸,可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫(即B.C.P指示剂,其pH在5.2以下呈黄色,pH在6.8以上呈紫色),经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气,可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。第4页,共38页,星期六,2024年,5月[方法]:取糖发酵管培养基,此时培养基应呈澄清、紫色,倒立小管内无气泡,接种细菌后置37℃温箱培养18-24小时,观察结果。[结果]:1、确定细菌是否生长2、产酸,则培养基指示剂(溴甲酚紫)变为黄色,以“+”表示。3、产酸又产气,则培养基除变黄外,在倒置的小管中有气泡,用“”表示。4、不发酵糖类,培养基仍为紫色,小管内无气泡,以“-”表示。第5页,共38页,星期六,2024年,5月大肠杆菌伤寒杆菌副伤寒杆菌葡萄糖+乳糖--第6页,共38页,星期六,2024年,5月葡萄糖:+-麦芽糖:-+第7页,共38页,星期六,2024年,5月甘露醇:+-鼠李糖:-+第8页,共38页,星期六,2024年,5月原理:细菌分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加的,称为氧化型;可以进行无氧降解的,称为发酵型;不分解葡萄糖的称为产碱型培养基:HL二氏培养基方法:待测菌同时接种两只HL培养基,其中一只滴加无菌的液体石蜡,高度不少于1cm,35℃培养48h或更长结果:两只均无变化为产碱型;两只均产酸为发酵型;仅不加石蜡的产酸为氧化型意义:肠杆菌科与非发酵菌的鉴别;葡萄球菌与微球菌的鉴别,前者为发酵型,后者为氧化型第9页,共38页,星期六,2024年,5月原理:有的细菌可以产生β半乳糖苷酶,分解邻-硝基酚-β半乳糖苷生成黄色

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