高效液相色谱法测定食醋和酱油中 苯甲酸钠和山梨酸钾含量实验报告.pdfVIP

高效液相色谱法测定食醋和酱油中

苯甲酸钠和山梨酸钾含量

摘要：【目的】用高效液相色谱法测定食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾含量。

【方法】以HypercloneBDSC18柱(150×4.60mm，5μm，phenomenex)

为色谱柱；检测波长215~230nm，进样量10μL，流动相：甲醇：0.02mol/L乙

酸铵(35：65)，流量0.8mL/min，柱温30℃【结果】：食醋中的苯甲酸钠含量

为127.15899ug/mol，酱油中的苯甲酸钠含量为723.60033ug/mol，未见则

出山梨酸钾。【结论】：高效液相色谱法具有高速、高效、高灵敏度的

优点，所以数据准确，用外标法计算结果操作简单，计算方便，得出样品中苯甲

酸钠的含量。

关键词：高效液相色谱法外标法苯甲酸钠山梨酸钾

一、前言

苯甲酸钠，化学式：C6H5O2Na，是苯甲酸的钠盐，苯甲酸钠是很常用的防腐

剂，有防止变质，延长保质期的效果。山梨酸钾别名2,4-己二烯酸钾，是山梨

酸的钾盐，也是防腐剂。本实验采用高效液相色谱法对酱油和醋中的苯甲酸钠和

山梨酸钾的含量测定，方法简便快速，实用于苯甲酸钠和山梨酸钾的定量分析。

苯甲酸结构式：山梨酸钾结构式：

二、实验目的和实验原理

2.1.实验目的：

（1）了解高效液相色谱仪基本结构和工作原理，以及初步掌握其操作技能；

（2）学习高效液相色谱保留值定性方法和外标法的标准曲线定量方法；

（3）掌握RP-HPLC法对食品中苯甲酸钠和山梨酸钾的测定方法；

2.2．实验原理：

将样品加热去除其中的二氧化碳和乙醇，用（1+1）氨水调pH值近中性，过

滤后进高效液相色谱仪，进行反相色谱C18柱分离后，根据保留时间和峰面积进

行定性定量分析。

三、仪器与试剂及试剂处理

3.1.仪器：

高效液相色谱仪【高压输液泵LC-6A，检测器SPD-10A，保温箱CPD-10AS，

进样阀7725I】；电子天平；纯水仪；离心机；超声波清洗机。

3.2．试剂：

（1）色谱甲醇经滤膜0.45μm过滤；

（2）（1+1）氨水：氨水与水等体积混合；

（3）乙酸铵溶液0.02mol/L：称取1.54g乙酸铵，加水溶解并定容至1000ml，

经过（0.45μm）过滤；

（4）碳酸氢钠溶液20g/L：称取2g碳酸氢钠（优纯级），加水至100ml，振荡溶

解；

（5）苯甲酸钠标准储备液：准确称取0.1000g苯甲酸钠，加碳酸氢钠溶液

（20g/L）5ml，加热溶解，移入100ml容量瓶中，加水定容至刻度。此溶液中苯

甲酸钠含量为1mg/L，作为储备液；

（6）山梨酸钾标准储备液：准确称取0.1000g山梨酸钾，加碳酸氢钠溶液

（20g/L）5ml，加热溶解，移入100ml容量瓶中，加水定容至刻度。此溶液中山

梨酸钾含量为1mg/L，作为储备液；

(7)苯甲酸钠、山梨酸钾标准混合使用溶液：取苯甲酸钠、山梨酸钾标准储备液

各1.0ml，放入100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液含苯甲酸钠、山梨酸

钾各0.01mg/ml。经滤膜（0.45μm）过滤；

四、实验方法

采用RP-HOLC法，以HypercloneBDSC柱(150×4.60mm，5μm，phenomenex)

18

为，色谱柱；检测波长215~230nm，进样量10μL甲醇：0.02mol/L乙酸铵(35：

65)为流动相，流量0.8mL/min，柱温30℃，PH=7

五、实验过程及操作

5.1.样品的处理：

称取10mL样品于烧杯中，微温除去二氧化碳，用稀氨水（1+1）调pH至7，

加水定容至50ml。备用。使用前取样液1-2ml于小离心管中120