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规模化羊场多动物链球菌病诊断与防治技术规程

1范围

本文件规定了规模化羊场多动物链球菌病诊断与防治技术的术语和定义、诊断、预防和治疗。

本文件适用于规模羊场多动物链球菌病的防治。其他羊场参照执行。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）

适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1多动物链球菌病（Streptococcuspluranimalium）：是指由多动物链球菌引发羊的一种呈现多种

临床表现的传染病。

4试剂与材料

4.1试剂配制

4.1.15%脱纤维羊血培养基：豆粉琼脂培养基38.0g溶解于950mL蒸馏水中,121℃高压灭菌20min,冷至50-55℃时无菌操作加入50mL预温至37℃的无菌脱纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿，4℃

保存。

4.1.25%脱纤维羊血的MH琼脂培养基：牛肉粉6.0g，可溶性淀粉1.5g，酸水解酪蛋白17.5g，琼脂17.0g溶解于950mL蒸馏水中,121℃高压灭菌20min,冷至50-55℃时无菌操作加入50mL预

温至37℃的无菌脱纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿，4℃保存。。

5仪器与设备

5.1CO2恒温培养箱。

5.2酒精灯。

5.3载玻片。

5.4盖玻片。

5.5草酸铵结晶紫。

5.6碘液。

5.795%乙醇。

5.8番红染色液。

5.9显微镜。

6诊断

6.1流行病学调查

多动物链球菌可造成牛、羊、马、犬、羊驼等多种动物、多个组织器官感染。长途运输、饲养

环境变化、气候变化等因素可诱发多动物链球菌病的发生。可通过呼吸道和消化道等途径传播。

6.2临床症状诊断

肺炎型：体温升高、四肢乏力、行动困难、呼吸急促、咳嗽。

6.3病理变化诊断

全身多处可见水泡，肺组织肿胀，表面淤血、出血。

6.4病原检查

6.4.1样本采集

肺炎型：按照GB/T14926执行。如果24h内不能送达实验室，-20℃保存。样品解冻时，置于38

℃~40℃水浴解冻。

6.4.2分离培养操作方法

将采集的肺脏组织表面消毒后，剪取肺脏深部组织一小块，然后无菌操作条件下接种于脱纤维羊血固体培养基，置于37℃、5%CO2恒温培养箱中培养24h后，无菌操作条件下挑取单菌落接种在新的5%脱纤维羊血固体培养基上，5%CO2培养箱37℃培养24h后，观察菌落形态，并挑取单菌

落进行革兰氏染色，镜检。

6.4.3菌落观察

观察到散在的淡灰色、透明，小针状菌落，菌落周围呈现溶血现象。经革兰氏染色后，镜检观

察到呈链状的革兰氏阳性菌。

6.4.4药敏试验

参照CLSI2018版指南进项药物敏感性试验研究。采用Kirby—Bauer法，将菌液的浓度调整至0.5个麦氏浊度标准，无菌操作将菌液均匀涂布于含5%脱纤维羊血的MH琼脂培养基，待培养基表面干燥后将药敏纸片贴于培养基表面，置于37℃、5%CO2恒温培养箱培养12h后测量抑菌圈的直径，肺

炎链球菌ATCC49619作为质控菌株，每种药物做三个重复。

6.5结果判定

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符合6.1、6.2和6.3的特征判断为疑似病例。

同时符合4.6或4.7的特征判断为确诊病例。

7预防和治疗

7.1预防

加强饲养及环境卫生管理，定期消毒，定期监测。不从疫区或发病区引进羊。羊只引进后应隔

离观察并采取应激预防措施，确保无病后方可混群。

7.2治疗

7.2.1单一药物治疗：可使用阿米卡星、庆大霉素、红霉素、美罗培能、氨苄西林舒巴坦、头

孢他啶、替加环素、米诺环素等药物，使用剂量参照说明书。