豆芽中氟喹诺酮和硝基咪唑类药物残留量的测定 液相色谱-质谱谱法.docxVIP

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豆芽中氟喹诺酮和硝基咪唑类药物的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了豆芽中恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、洛美沙星、甲硝唑、二甲硝咪唑、异丙硝唑、洛硝哒唑含量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于豆芽中恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、洛美沙星、甲硝唑、二甲硝咪唑、异丙硝唑、洛硝哒唑含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

试样用1%乙酸乙腈提取，经均质提取、浓缩、正己烷净化、离心后，用液相色谱-串联质谱仪测定，用基质外标法定量。

4试剂和材料

除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。

4.1试剂

4.1.1乙腈：色谱纯。

4.1.2乙腈：分析纯。

4.1.3乙酸：分析纯。

4.1.4氯化钠：分析纯。

4.1.5甲醇：色谱纯。

4.1.6甲酸：色谱纯。

4.1.7甲酸铵：色谱纯。

4.1.8正己烷：色谱纯

4.2试剂配制

4.2.11%乙酸乙腈：移取5mL乙酸（4.1.3）和495mL乙腈（4.1.2）混合。

4.2.2复溶液（0.1%甲酸30%甲醇水溶液）：300mL甲醇（4.1.5）、1mL甲酸和699mL水混合。

4.3标准品

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氟喹诺酮类8种、4种硝基咪唑类标准物质：纯度均大于等于90%（详见附录A）

4.4标准溶液配制

4.4.1标准储备溶液

标准储备液：准确称取适量每种氟喹诺酮和硝基咪唑类标准物质（4.3）于25.00mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混合均匀，转移至储液瓶中，-18℃以下避光保存，有效期为6个月。

4.4.2标准中间液

标准中间液：分别准确移取每种标准储备液（4.4.1）于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成10.0μg/mL的标准中间液，混合均匀，转移至储液瓶中，-18℃以下避光保存，有效期为3个月。

4.4.3混合标准工作液

分别准确移取每种1.00mL标准中间液（4.4.2）于10.00mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成1.00μg/mL混合均匀，转移至储液瓶中，4℃以下避光保存，有效期为7天。

4.4.4标准工作曲线

移取一定体积的混合标准工作液（4.4.3）用空白基质液分别配制成含4.00μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、250μg/L、500μg/L的8种氟喹诺酮类和4种硝基咪唑类标准工作溶液，浓度由低到高进样检测，以定量子离子的峰面积为纵坐标，对应浓度为横坐标，采用直线拟合的方式绘制标准工作曲线。实际检测中，经验证后可适当调整标准曲线的浓度范围。

5仪器

5.1液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾（ESI）离子源。

5.2高速组织捣碎机。

5.3分析天平，感量0.01g和0.00001g.

5.4氮吹仪。

5.5涡旋混匀器（2500r/min）。

5.6离心机：转速≥12000r/min。

5.7超声清洗仪。

5.810mL试管。

5.9离心管：50mL。

5.10容量瓶：25mL。

5.11尼龙膜:0.22μm。

6试样的制备与保存

取代表性豆芽样品约500g，将其切碎后（不可用水洗），经高速组织捣碎机均匀捣碎，均分成两份，装入洁净容器内，密封，-18℃以下保存。

7分析步骤

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7.1样品处理

称取5g（精确至0.01g）试样，于50mL离心管中，加入5mL水和10mL1%乙酸乙腈（4.2.1）均质1min，超声提取20min，加入5g氯化钠（4.1.4）涡旋1min，12000r/min离心3min，上层有机相转移到25mL容量瓶中。残渣再用10mL1%乙酸乙腈（4.2.1）重复提取一次，合并两次提取液，用1%乙酸乙腈（4.2.1）定容到25mL，混合均匀，准确移取10mL提取液于10mL试管中，40℃氮吹至近干。加入1mL复溶液（4.2.2），超声3min、涡旋3min，溶解残渣，再加入1mL正己烷，涡旋30s，12000r/min离心3min，取下层清液过0.22μm尼龙膜于样品瓶中，供液相色谱-串联质谱仪测定。

7.2测定

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