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侵入(penetration,injection)噬菌体尾部的酶水解细胞壁的肽聚糖,使细胞壁产生小孔,尾鞘收缩,将头部的核酸通过中空的尾髓压入细胞内,而蛋白质外壳留在细胞外。从吸附到侵入的时间间隔很短,只有几秒至几分钟。BACTERIOPHAGET4*增殖(replication)烈性噬菌体增殖方式按核酸复制类型分三类按早期、次早期和晚期基因的顺序来进行转录、转译和复制的双链DNA噬菌体的增殖方式;按“滚环”模型复制单链DNA的增殖方式;按“花朵”模式复制A蛋白(成熟蛋白)、衣壳蛋白和复制酶蛋白的增殖方式。病毒复制指病毒粒入侵宿主细胞到最后细胞释放子代毒粒的全过程以宿主细胞降解物及培养基介质为原料,大量合成子代噬菌体的头部、尾部和核酸等部件。*先是将复制后的核酸聚缩成多角体,头部蛋白质经排列和结晶过程,包围多角体便形成头部;成熟(maturity)即噬菌体自装配(selfassembly)。尾部各构件同时进行组装,然后与头部连接;最后装上尾丝完成新的噬菌体装配。装配过程是通过3个独立的装配途径进行的。*释放(release)方式:裂解(lysis):成熟的噬菌体粒子,利用水解细胞膜的脂肪酶和水解细胞壁的溶菌酶的作用,从细胞内部促进细胞裂解,从而实现了噬菌体的释放。裂解量(burstsize):平均每个宿主细胞裂解后产生的子代噬菌体数。自外裂解(withoutlysis)、分泌:噬菌体穿出细胞壁,不导致细胞裂解,但是大量噬菌体聚集在同一宿主细胞表面,释放大量溶菌酶而导致细胞裂解。噬菌斑:由于噬菌体的作用而使布满细菌细胞的菌苔上,出现肉眼可见的一个个透亮的小圆斑。*ReleaseofthePf1Phage.ThePf1phageisafilamentousbacteriophagethatisreleasedfromPseudomonasaeruginosawithoutlysis.*完成一个裂解性周期经历的时间*2、噬菌体效价效价:噬菌体浓度、噬菌斑形成单位数(plaque-formingunit,pfu)。1毫升培养液中所含有的具有侵染性的噬菌体数量。测定:双层琼脂平板法(twolayerplatingmethod)。先在培养皿中倒入底层固体培养基,凝固后再倒入含有宿主细菌和一定稀释度噬菌体的半固体培养基。培养一段时间后,计算噬菌斑的数量。**3、一步生长曲线(one-stepgrowthcurve)用高倍稀释或抗血清办法来中和未吸附病毒,使病毒感染数降低后,达到适量的病毒悬液,然后感染标准培养条件下的高浓度的细胞溶液,在不同时间段采样,测定溶液感染效价,以时间为X轴,效价为Y轴,得到曲线,称为一步生长曲线)。分三个时期:潜伏期裂解期平稳期*潜伏期(latentphase)隐晦期(eclipsephase)胞内累积期(intracelluaraccumclationphasr)裂解期(lyticphase)平稳期(plateau)**4、溶源性(lysogeny)溶源性当温和噬菌体侵入宿主细胞后,DNA整合到宿主基因组上,随着宿主DNA复制而复制,但不合成蛋白质,宿主细胞不裂解,继续进行正常的分裂现象。温和噬菌体引起溶源性的噬菌体。溶源性细菌(lysogen)又称溶源菌含有温和噬菌体DNA的宿主细菌。前噬菌体(prophage)整合在细菌基因组中的噬菌体基因组。温和噬菌体的三种存在状态游离态:游离的具有感染性的噬菌体颗粒;营养态:宿主胞质内类似质粒形式的噬菌体,处于复制、合成、装备的状态;整合态:前噬菌体。*溶源性细菌的特性自发裂解在没有任何外来噬菌体感染的情况下,极少数溶源细胞中的原噬菌体偶尔也可恢复活动,进行大量的复制成为营养噬菌体核酸,并接着成熟为噬菌体粒子,引起宿主细胞裂解。诱发裂解理化因子如紫外线、丝裂霉素C等处理溶源性细菌能导致原噬菌体活化免疫性溶源性细菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源噬菌体不敏感。复愈性溶源性细胞有时消失了其中的原噬菌体,变成非溶源性细胞,溶源转变*溶源性裂解性*第二节亚病毒一、类病毒类病毒(viroid)只含有RNA分子(环状ssRNA),二级结构形成封闭的短dsRNA。专性寄生活体的分子病原体。仅在植物上发现,感染寄主细胞后在寄主细胞中自我复制使寄主产生病症。马铃薯纺锤形块茎病类病毒(potatospindletuberviroid,PSTV),呈棒形,是一个裸露的闭合环状RNA分子
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