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二、抗原与抗体间的主要反应1、血清学反应凝集反应颗粒性抗原(完整的细菌细胞或血细胞等)与相应的抗体在合适的电解质条件下反应并出现肉眼可见的凝集现象,称凝集反应或直接凝集反应此抗原又称凝集原,抗体则称凝集素凝集反应的具体方法①直接法玻片法和试管法例如菌种鉴定的玻片凝集试验,肥达氏试验(Widal’stest),诊断伤寒或副伤寒症的试管定量试验。②间接法典型的间接凝集试验又称被动凝集反应。基本原理:将可溶性抗原吸附到适当载体如:人和动物的红细胞、活性炭等,制成人工的“颗粒性”抗原,产生凝集反应可用肉眼检出。反相间接凝集试验:把抗体吸附于红细胞等颗粒上,以检出相应的抗原,例如检查血液中HBsAg(乙型肝炎表面抗原)等,沉淀反应可溶性抗原与其相应的抗体在合适条件下反应,并出现肉眼可见的沉淀物现象,称为沉淀反应此抗原又称沉淀原,如蛋白质、多糖溶液,血清,细菌抽提液和组织浸出液。此抗体又称沉淀素。测沉淀反应的方法环状沉淀反应又称环状试验:先在小口径试管内加入已知抗血清(抗体),然后将稀释好的待检抗原加在抗血清层之上,使两层界限分明。反应后若在界面上出现白色沉淀环,为阳性。絮状沉淀反应又称絮状反应。把抗原与相应抗体在试管内或凹玻片上混匀,凡出现肉眼可见的絮状沉淀颗粒者,即为阳性反应免疫扩散法:抗原与抗体在半固体凝胶介质中作相对方向的自由扩散或在电场中进行电泳,由于反应物的分子大小、形状和电荷的不同,导致两者的扩散或泳动速度的差异,在合适的比例处形成特异的沉淀带。补体结合试验补体结合试验是一种有补体参与,以绵羊红细胞和溶血素(红细胞的特异抗体)是否发生溶血反应作指示的一种高灵敏度的抗原与抗体结合反应。反应体系:基本原理:①补体可与任何抗原和抗体的复合物相结合;②指示系统如遇还未被抗原和抗体复合物所结合的游离补体,就会出现肉眼易见的溶血反应。2、免疫标记技术某些小分子物质,如荧光素、酶或放射性同位素等,结合到抗原或抗体上,并不影响抗原抗体的反应,将抗原或抗体用小分子加以标记,以提高检测的灵敏度的技术,称免疫标记技术免疫标记技术包括:免疫荧光技术放射免疫技术免疫酶技术免疫电镜技术免疫荧光技术荧光抗体法(FAT):将结合有荧光素的荧光抗体与抗原进行反应,以提高免疫反应灵敏度和适合显微镜观察的免疫标记技术。荧光素:异硫氰酸(FITC)、罗丹明等放射免疫技术放射同位素:125I、3H、35S免疫酶技术又称酶免疫测定法;一种利用酶作标记的抗体,用酶的底物处理标本来显示酶标记的抗体,以提高检测抗原、抗体反应灵敏度的免疫标记技术。原理:由于酶的催化作用,使原来无色的底物通过水解、氧化或还原反应而显示出颜色常用的酶:辣根过氧化物酶(HRP),碱性磷酸酶(AP)酶联免疫吸附法(ELISA):将可溶性抗体或抗原吸附到固相载体进行免疫酶反应,用分光光度计定性或定量测定的技术。酶标记免疫定位:用组织切片或细胞样品代替固相抗原。免疫电镜技术免疫电镜技术是一种采用电子致密物质标记的抗体与其相应抗原发生特异性结合后,借电镜检出标记复合物的技术。标记物:辣根过氧化物酶和铁蛋白免疫胶体金技术采用胶体金或金、银的微粒来对抗体进行标记,以进行细胞表面标志定位、免疫细胞亚群计数或白血病分型等原理:胶体金颗粒表面带负电荷,可与抗体所带正电荷形成非共价键的静电吸引而牢固结合。3、自然杀伤细胞(naturalkillercell):又称NK细胞,可在无抗体、无补体或无抗原致敏的情况下直接杀伤靶细胞(某些肿瘤细胞或被病毒感染的细胞)。三、免疫分子免疫分子包括膜表面免疫分子体液免疫分子膜表面免疫分子包括膜表面抗原受体:如BCR和TCR白细胞分化抗原(CD):白细胞在不同发育分化阶段所特有的膜表面分子。粘附分子(AM):分布在免疫与非免疫细胞表面,介导细胞间、细胞与基质间的接触与结合的分子。主要组织相容性抗原(MHC抗原):参与T细胞对抗原的识别及免疫应答中各类免疫细胞间的相互识别作用,限制NK细胞不会误伤自身组织,是机体免疫系统区分自己与非已的重要分子基础。体液免疫分子包括抗体:特异免疫体液成分。补体:非特异免疫细胞因子(CK):是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。由免疫细胞分泌的低分子量多肽。具有对细胞功能的调节作用或直接参与免疫应答的效应过程。有多种其他名称:单核因子、淋巴因子、集落刺激因子等一、抗原1、概念抗原:又称免疫原,是一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞受体发生特异性免疫反应的大分子物质。抗原应具备两个特性:①免疫原性:又
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