2025版高考生物二轮复习课件 限时练24 赋予生物新的遗传特性的基因工程.pptx

;重点1基因工程和蛋白质工程

1.(2024·广西南宁市摸底)镰状细胞贫血是一种常染色体隐性遗传病，由正常血红蛋白基因(HbA)突变为镰状细胞贫血基因(Hbs)引起，HbA和Hbs的某片段如图甲。对胎儿进行基因检测的主要原理是：用MstⅡ限制酶处理PCR扩增后的DNA；加热使被酶切的DNA片段解旋，用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交；凝胶电泳分离。图乙是凝胶电泳后荧光出现的三种可能性。回答下列问题：;(1)图甲为基因HbA和Hbs的部分片段，据图可知，镰状细胞贫血是基因中发生___________导致的。基因突变具有不定向性，可产生_________________基因。

(2)胎儿c的基因型为________，与胎儿c具有相同基因型的一对夫妇生下患镰状细胞贫血女儿的概率为________。;(3)基因治疗是治疗镰状细胞贫血最有效的方法，治疗时要构建含HbA的基因表达载体，构建基因表达载体首先需要用同一种限制酶切割HbA和质粒，目的是_________________，再用DNA连接酶连接，DNA连接酶的主要功能是___________________________________________________________________。构建基因表达载体的目的是____________________________________________

___________________________________________________________________。;解析(1)据图甲分析可知，镰状细胞贫血是相应基因中发生碱基替换的结果。基因突变具有不定向性，可以产生一个以上的等位基因。;(2);(3)用同一种限制酶切割HbA和质粒，目的是让HbA和质粒形成相同的末端。之后再用DNA连接酶连接，DNA连接酶的主要功能是将切下来的双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。构建基因表达载体的目的是让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时能够使目的基因表达并发挥作用。;2.(2024·南京市调研)PSMA3是蛋白酶体的重要组成成分之一，与恶性肿瘤的发生和发展有密切关系。为探寻PSMA3与肝细胞癌(HCC)的关系，科研人员通过构建含人PSMA3基因的重组腺病毒(pAd/PSMA3)并开展了相关研究，以期为HCC早期诊断和治疗奠定基础。如图为重组腺病毒的构建流程，其中GFP为绿色荧光蛋白基因。请回答下列问题。;限制酶;(1)过程①以提取的总RNA为模板，在__________酶的作用下获得PSMA3的cDNA，该cDNA与人体细胞核中PSMA3基因在??构上的区别是该cDNA没有_______________________。;(2)为防止过程②中PSMA3基因与质粒1错误连接，可在PSMA3基因的上游引物和下游引物的5′端分别添加限制酶________________________________的识别序列。;(3)过程④为同源重组，该过程首先需要用核酸外切酶从线性化DNA分子一条链的末端按3′→5′的方向顺次水解若干个磷酸二酯键，其目的是形成________末端，再经____________酶的作用形成重组腺病毒载体。;(4)过程⑥常用脂质体包裹DNA片段，目的是______________________________。

转染后，可通过荧光显微镜观察____________________基因的表达强度来初步筛选目标239A细胞。;解析(1)以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录，该过程需要逆转录酶参与。与人体细胞核中的PSMA3基因相比，经逆转录获得的PSMA3的cDNA在结构上缺少启动子、终止子和内含子。;(2)应将PSMA3基因插到质粒1的启动子和终止子之间，为防止目的基因和质粒发生自身环化和目的基因在质粒中反向连接，需要进行双酶切。由题图可知，质粒1启动子和终止子之间含有限制酶SalⅠ、EcoRⅤ和Sau3AⅠ的识别序列，且质粒1中还含有限制酶BclⅠ的识别序列。由题表知，BclⅠ的识别序列和酶切位点为T↓GATCA，Sau3AⅠ的识别序列和酶切位点为↓GATC，若使用限制酶Sau3AⅠ对质粒1进行切割，会将终止子切下来，因此不能使用限制酶Sau3AⅠ对质粒1进行切割。经分析可知，应选择限制酶SalⅠ和EcoRⅤ对质粒1进行酶切，又知质粒1中限制酶SalⅠ的识别序列位于限制酶EcoRⅤ识别序列的上游，因此，为了使PSMA3基因与质粒1正确连接，可在PSMA3基因的上游引物和下游引物的5′端分别添加限制酶SalⅠ和EcoRⅤ的识别序列。;(3)据题表可知，过程③是用限制酶PmeⅠ切割的，形成的是平末端。过程④为同源重组，该过程首先需要用核酸外切酶从线