实验-紫外可见吸收光谱法-苯的紫外光谱的测定与分析.doc

PAGE

PAGE15

实验紫外—可见分子吸收光谱法的应用—苯的紫外光谱的测定与分析

一、实验目的

1、掌握如何利用紫外分子吸收光谱仪进行定性和定量分析；

2、掌握双光束紫外—可见（UV—VIS）分光光度计的使用。

二、实验原理

许多有机化合物在一定能量的电磁辐射下伴随着价电子能级的跃迁。根据量子理论：基态原子发生跃迁所吸收的能量是既定的，即满足ΔE=E1-E0=hv时,才能产生跃迁。产生各种跃迁所需的能量为：ΔE电子≈1～20eV；ΔE振动≈ΔE电子×（1/10～1/100）≈0.01～2eV；ΔE转动≈ΔE震动×（1/10～1/100）≈1×10-4～0.02eV,紫外可见光波长范围为:λ可见=800nm～200nm.(常用的波长分析范围。因为200nm～10nm为真空紫外区，主要是CO2、O2等对这波长范围的谱线有严重的吸收，导致干扰分析测定，所以要求在真空中进行测定)。相对的能量为6.2eV～1.6eV，其能量可以满足部分电子能级跃迁的需要。此外，在电子能级跃迁中也伴随着相应的振动和转动能级的变化（ΔE电子ΔE震动ΔE转动），若是仪器的分辨能力不高，则使三种谱线（或精密结构）密集在一起，则使打印出来的图谱的峰宽变宽（在仪器分辨能力一定时，溶剂由极性到非极性也可使这些精密结构消失）。利用分子中生色基团对特定谱线的吸收可进行定性分析，利用浓度与吸收值成正比（即朗伯—比尔定律）可进行定量分析。进行定性分析时，一般用的是比较法，把待分析的未知化合物的谱图与纯的已知物的谱图或标准谱图（如萨勒特光谱图等）进行比较；也可以用有机化合物吸收波长的经验规则的计算值进行分析。但应该注意的是：相同的紫外吸收光谱不能充分地证明两种化合物是完全相同。因为只要有相同的发色基团，而分子结构就算不同，它们的最大吸收波长λmax仍然相同。所以紫外—可见光谱图在分析未知化合物时只是提供有可能的基团结构信息，常和NMR、MS和IR（即四谱）联用，使得分析更为准确、可靠。

苯有三个吸收带，分别为：E1带(180nm，εmax=6×104L·cm-1·mol-1)、E2带（204nm，εmax=8×10L·cm-1·mol-1）和B带（255nm，εmax=200L·cm-1·mol-1），都是n→n*的跃迁.在分析的时候可以大致进行判定.本实验主要研究苯的B带.

三、仪器与试剂

1、仪器UV-2100型双光束紫外可见分光光度计（附1cm的石英比色皿）

2、试剂0.1mol/l苯储备溶液环己烷(A.R.)无水乙醇（AR）

四、实验步骤

通电之前检查样品室，拿出硅胶袋，样品室除比色皿架外，不应有其他物体。

打开主机电源开关，预热仪器。仪器预热30分钟后，打开计算机，点击桌面UV-2100操作软件图标，进入紫外可见分光光度计仪器自检画面，点击开始，启动自检程序。自检运行大约三分钟后，全部自检项目“OK”，出现“自检完成，您可以进行测量了”的对话框，按下【确定】键，即可开始正常测量工作。

未知物的光谱图扫描（定性分析测定）：选择工具栏中的[光谱]项，进入光谱扫描测量后，首先点击【参数】项，根据光度、光谱、动力学等测量方法设定相应的测量参数。

设置好参数后，将参比池和样品池都加入参比液（无水乙醇或环己烷），盖好样品室盖。按下显示窗【Baseline【命令按钮，自动校正仪器基线（注意：此工作只需要在第一次测量时进行，只要不改变参比溶液和测量波长范围的情况下，只需校准一次）。

在样品池中加入样品液（苯标液），单击【测量】命令按钮。即可进行测量运行测量完成后，点击工具栏上的【尺标】，或者点击图谱右侧的【样品数据】即可观察数据。选择合适的波长为定量步骤测定浓度用，其波长为（nm）。

6、浓度的测量（定性分析测定）：

a、苯标准样品(,溶剂为环己烷或乙醇)的制备：取四个10mL的容量瓶，用吸量管分别取0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL的0.1mol/l苯储备溶液，用环己烷（A.R.）或乙醇定容至刻度。

b、待测样品的制备:取三个10mL的容量瓶，用吸量管分别取0.6mL、0.9mL、1.2mL的0.1mol/l苯储备溶液，用环己烷（A.R.）或乙醇（A.R.）定容至刻度。

C、选择工具栏中的[定量]项，进入定量测量界面，点击【参数】项，首先选择测量方法为单波长标准曲线法，选择零点插入，根据定性分析测的的波长，设定测量波长。根据标准样品个数，设定标准样品数（0浓度除外）。参数设定完毕后点击确定，退出。

先在参比池及第一个样品池中都加入参比液，点击下方工具栏中的【调节零点】。取出第一个样品池中的参比液，将苯标准样品液依次放入样品池中，点击测量，并填入相应的标准样品号，并记录读数。

点击下方工具栏的【样