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天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为。——《孟子》

1实验室与基本操作(植物组织培养)

第一章实验室与基本操作

第一节实验室及其基本设备

实验室的大小取决于工作的目的和规模：

1.以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产影响效率。

2.在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来设计避免某些环节

倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。

要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制

温度、光照、湿度等培养条件。

实验室设计

标准的组织培养实验室包括：洗涤室(准备室)；配置室；灭菌室；

接种室；培养室；观察室等

一、准备室

作用：材料、培养器械的清洗、培养基准备、灭菌等的准备工作。

普通化学实验室：仪器及设备、化学药品。

纯水仪、冰箱、移液枪、过滤灭菌器、电炉、微波炉、磁力搅拌器、

低速台式离心机、电脑等作用：配制培养基。

洗涤室：清洗、贮存器皿设施、鼓风干燥箱等。作用：玻璃器皿、用

具和培养材料的洗涤。

灭菌室：

天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为。——《孟子》

①高压蒸气灭菌装置：如立式、卧式和手提式灭菌器。作用：培养基、

器械、棉塞、无菌纸等灭菌消毒②细菌过滤器

作用：进行植物材料分离接种的重要场所，需长期的无菌操作，对

组织培养成功起关键作用。

试验设施；超净工作台；紫外灯；固定式和挪移式载物台；消毒器、

广口瓶、酒精灯、酒精棉、机械支架；手术剪、解剖刀、解剖针、镊子等

超净工作台(alaminarflowhood)

工作原理:利用鼓风机驱动空气通过高效过滤器除去空气中的尘埃颗

粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌

环境。

作用：进行材料的培养的场所。其大小、规模可根据工作性质设定。

以充分利用空间和节能为原则。

设备：可调控光、温、湿度等设备。还有固定式培养架、转床、摇床。

合用于器官(芽、茎、花药等)、愈伤组织、细胞和原生质体的固体培养

和液体培养。

作用：细胞学和组织学观察。

设备：需备有高倍显微镜、体视显微镜、倒置显微镜、各种相机、恒

温箱、切片机、恒温水浴、滴瓶、染色缸、载玻片、盖玻片等。

天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为。——《孟子》

作用：哺育组织与细胞培养出来的材料，组培苗的移栽锻炼。

第二节基本操作

1、重铬酸钾洗液：

饱和的重铬酸钾洗液：43克重铬酸钾溶于1000毫升蒸馏水中(饱和

溶液)。按1：1体积比将浓硫酸缓慢地倒入饱和重铬酸钾水溶液中。

流程：(12h)

水洗→晾干→重铬酸钾洗液→→自来水冲净、蒸馏水洗两次→干燥2、

洗涤剂：洗衣粉、洗液

3、超声波洗净器：小型玻璃器皿，顽强性污渍。超声波除污。(要

加水)新的玻璃器皿：0.1﹪HCl浸泡12小时，洗衣粉、自来水洗、蒸馏

水冲。污染的玻璃器皿：要先高压灭菌后，然后再刷洗。要避免交叉污染。

1、干热灭菌：利用鼓风干燥箱(烘箱)进行烘烤灭菌的方法。箱内

温度控制在150℃，120min。玻璃器皿.2、湿热灭菌：利用高压蒸汽灭菌

的方法。普通温度为121℃，压力0.1MPa，消毒15~20min。培养基灭菌.

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