2025版·《考点一遍过》高考生物考点79 基因工程（一）.pdf

1．基因工程的概念

（1）供体：提供目的基因。

（2）操作环境：体外。

（3）操作水平：分子水平。

（4）原理：基因重组。

（5）受体：表达目的基因。

（6）本质：性状在受体体内的表达。

（7）优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物的遗传性状。

2．DNA重组技术的基本工具

（1）限制性核酸内切酶(简称：限制酶)

①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

②作用：识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

③结果：产生黏性末端或平末端。

（2）DNA连接酶

①种类：按来源可分为E·coliDNA连接酶和TDNA连接酶。

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②作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

③DNA连接酶和限制酶的关系

（3）载体

①种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

②质粒的特点Error!

考向一限制性核酸内切酶、DNA连接酶等酶的作用

1．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接

酶、解旋酶作用的正确顺序是

A．①②③④B．①②④③

C．①④②③D．①④③②

【参考答案】C

解题技巧

确定限制酶的种类

（1）根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类

①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。

②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。

③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如

图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。

（2）根据质粒的特点确定限制酶的种类

①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。

②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制

酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能会丢失某些片段，若丢

失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。学科网

2．若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙)，限制性核酸内切酶的酶

↓↓↓

切位点分别是BglⅡ(AGATCT)、EcoRⅠ(GAATTC)和Sau3AⅠ(GATC)。下列分析合理的是

A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

【答案】D

考向二载体的作用及特点分析

3．下列关于基因工程中载体的叙述，错误的是

A．常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等

B．目的基因与载体结合的过程发生在细胞外

C．载体上含有标记基因，可用于检测目的基因是否导入受体细胞

D．质粒可作为基因工程的载体，其化学本质是小型链状DNA

【参考答案】D

【试题解析】基因工程常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，A正确；基因工程的操作环境是

在生物体外，因此目的基因与载体结合的过程发生在细胞外，B正确；载体上含有标记基因，其作用是

检测目的基因是否导入受体细胞，C正确；质粒的化学本质是小型环状DNA分子，D错误。

技法提炼

载体上标记基因的标记原理

载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。目的基因要转入的受体细胞没有抵抗相关抗生素的能