肺炎克雷伯菌噬菌体的分离鉴定及体外联合用药效果评价.pdf

摘要

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本研究从广东省个市的羊场采集了份羊鼻拭子样品，通过分离纯化、染色

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镜检等方式进行致病菌的分离鉴定。结果显示：从样品中分离得到株肺炎克雷伯

菌，药敏试验结果显示，阿莫西林以及氧氟沙星耐药率高达100%，其余药物不同程

rmpAkfuBCureA88.0%85.7%

度有耐药性；毒力基因检测结果显示，、、分别为和、

83.3%aphAqnrAaacC4aacC2

；耐药基因检测结果显示：耐药基因、、、的检出率为

42.5%40%30%22.5%ERIC-PCR

、、、，其余耐药基因检出率较低。分型结果显示，

同源性在80%以上的可分为七个类群，其中群体为优势群体，占比Ⅰ66.6%。

以分离得到的肺炎克雷伯菌为宿主菌，从养殖场污水中成功分离得到两株肺炎克

vB_KpnP_Bc13vB_KpnP_Ke174

雷伯菌噬菌体，分别命名为、，并对其生物学特性进

行研究分析，宿主谱结果显示，两株噬菌体均有较窄的宿主谱；透射电镜结果显示，

噬菌体vB_KpnP_Bc13为有尾噬菌体目短尾噬菌体科，噬菌体vB_KpnP_Ke174为有

-20℃50℃

尾噬菌体目肌尾噬菌体科；在到环境下两株噬菌体均能保持活性的稳定；

vB_KpnP_Bc13pH5.0-10.0pH9

噬菌体在时活性稳定，且在时稳定性最高。噬菌

vB_KpnP_Ke174pH3.0-10.0pH3

体在时活性稳定，且在时具有较高的活性；通过

vB_KpnP_Bc13vB_KpnP_Ke174

测定最佳感染复数，噬菌体和的最佳感染复数分别

0.00010.001vB_KpnP_Bc13

为、；通过测定一步生长曲线测定噬菌体的裂解能力，和

vB_KpnP_Ke1745min30min180PFU/Cell140

的潜伏期分别为和，爆发量分别为和

PFU/Cell；对两株噬菌体进行受体鉴定，两株噬菌体的吸附受体均为脂多糖；核酸鉴

定结果显示，两株噬菌体均为双链DNA。

vB_KpnP_Bc13vB_KpnP_Ke174Bc13-Pr

将噬菌体和的耐受菌分别命名为和

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