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酶类药物
酶的分类
结晶☆4原料选择生物材料的预处理☆5提取1浓缩☆2纯化3酶类药物的提取和纯化
材料的预处理
酶的浓缩工业上:超滤、真空减压浓缩、薄膜浓缩、冷冻浓缩实验室:除上述方法外,对少量样品可用下列方法用G-15或G-25浓缩用聚乙二醇浓缩
213注意两个问题:1.建立快速的测定酶活力的方法建立活力回收表酶的纯化:凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化从大肠杆菌中提取天冬酰胺酶活力回收表
既是纯化的结果又是纯化的手段酶的结晶☆特征:有序性,对称排列,周期性的重复结构——为空间结构研究提供x-衍射样品1.酶的结晶方法缓慢改变酶蛋白的溶解度,使其略处于过饱和状态。(1)盐析法(2)有机溶剂沉淀法(3)复合结晶法(4)透析平衡法(5)等电点法
01酶的纯度02酶的浓度03金属离子04pH05温度、时间06晶种2.结晶的条件选择
防止酶蛋白变性01防止复因子丢失02防止酶被蛋白水解酶降解03酶的分离纯化工作中的注意事项
超氧化物歧化酶
(Superoxidedismutase,SOD)结构特点:金属酶Fe-SOD:Mw38000,2个亚基,每个亚基含1个Fe,存在于中Cu、Zn-SOD:Mw32000,2个亚基,每个亚基含1个Cu,1个Zn,存在于中Mn-SOD:原核细胞中,Mw40000,2个亚基,每个亚基1个Mn真核细胞中,Mw80000,4个亚基,每个亚基1个Mn真核细胞原核细胞
酶的性质
1.以牛血红细胞提取Cu、Zn-SOD的工艺
2.以牛肝为原料提取Mn-SOD的工艺
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