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基因工程的基本操作程序
[随堂检测]
1.(2024·淮安高二期中)图中甲、乙表示从细菌细胞中获得目的基因的两种方法,以下说法中错误的是()
A.甲方法可建立该细菌的基因组文库
B.乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C.甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D.乙方法须要逆转录酶参加
解析:选C。甲方法是以细菌中的DNA为基础,用限制酶进行切割,它包括了细胞全部的基因,可以建立基因组文库,并且可以从中选出所需的目的基因,不须要模板和原料。而乙方法是用逆转录的方法人工合成目的基因,它只能得到生物的部分基因,基因中只有编码区,所以组成的是该细菌的cDNA文库。
2.下列关于PCR技术的叙述,正确的是()
A.PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上
B.该技术须要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶
C.该技术须要一对特异性的引物,要求一对引物的序列是互补的
D.该技术应用体内DNA双链复制原理,也须要模板、原料、能量、酶等条件
解析:选D。PCR技术扩增的目的基因序列不肯定是已知的,A项错误;PCR技术是通过高温来使DNA解旋的,不须要解旋酶,B项错误;该技术须要的一对引物,分别能与模板DNA的两条链的末端进行碱基配对,其序列不是互补的,C项错误。
3.(2024·高考北京卷)为了增加菊花花色类型,探讨者从其他植物中克隆出花色基因C(图1),拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与试验目的不符的是()
A.用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒
B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C.在培育基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D.用DNA分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
解析:选C。目的基因C和质粒都有可被EcoRⅠ切割的酶切位点,另外须要DNA连接酶将切好的目的基因和质粒连接起来,A项正确;愈伤组织全能性较高,是志向的植物受体细胞,将目的基因导入植物受体细胞的方法通常为农杆菌转化法,B项正确;质粒中含有潮霉素抗性基因,因此选择培育基中应当加入潮霉素,C项错误;运用DNA分子杂交方法可检测目的基因是否整合到受体染色体上,D项正确。
4.(2024·枣庄高二检测)图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性缘由。下列叙述正确的是()
A.图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
B.在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
C.用PstⅠ和HindⅢ切割,可以保证重组DNA序列的唯一性
D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培育基中生长
解析:选C。图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,获得一个DNA片段,其只含有2个游离的磷酸基团,选项A错误;在构建重组质粒时,不能运用BamHⅠ切割外源DNA,因为用BamHⅠ切割会破坏目的基因的结构,但可以用PstⅠ和HindⅢ切割质粒和外源DNA,选项B错误;用PstⅠ和HindⅢ切割会得到2个DNA片段,再加入DNA连接酶,切开的质粒由于黏性末端不同,不会自身连接,从而保证重组质粒只能得到一种,即含有目的基因和标记基因neo的重组质粒,保证了重组DNA序列的唯一性,选项C正确;由于用PstⅠ切割质粒后,其中的氨苄青霉素抗性基因已被破坏,所以导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培育基中生长,选项D错误。
5.(2024·保定高二检测)如图表示培育转基因抗植物病毒番茄的过程示意图。下列叙述正确的是()
A.过程A须要限制酶和DNA聚合酶的参加
B.过程B须要用CaCl2处理,以提高番茄细胞壁的通透性
C.抗植物病毒基因一旦整合到番茄细胞的染色体上,就能正常表达
D.转基因抗植物病毒番茄是否培育胜利可通过抗病毒接种试验进行鉴定
解析:选D。题图中过程A为构建基因表达载体,须要用到限制酶和DNA连接酶,不须要DNA聚合酶,选项A错误;CaCl2处理只是提高农杆菌细胞的细胞壁的通透性,选项B错误;抗植物病毒基因整合到番茄细胞的染色体上,不肯定能表达,选项C错误;转基因抗植物病毒番茄是否培育胜利可通过接种特定病毒,视察番茄是否被感染的试验进行鉴定,选项D正确。
6.(2024·高考全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。
依据基因工程的有关学问,回答下列问题:
(1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接,理由是____________。
(2)若某人利用
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