食品中志贺氏菌检验.ppt

关于食品中志贺氏菌检验第1页，共19页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的 了解食品安全与志贺氏菌检验关系1了解志贺氏菌生理形态化学性质2掌握志贺氏菌检验方法和结果判断3检验食品中是否有志贺氏菌4第2页，共19页，星期日，2025年，2月5日二.实验原理需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，能分解葡萄糖，产酸不产气。不发酵乳糖，靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H2S。根据生化反应可进行初步分类。第3页，共19页，星期日，2025年，2月5日三、实验的试剂和仪器仪器与设备试剂和仪器培养基与试剂第4页，共19页，星期日，2025年，2月5日仪器与设备 规格名称 数量 用途 1、500ml广口瓶 1个 稀释样品 2、500ml三角瓶 1个 制增菌液 3、250ml三角瓶 4个 制培养基 4、18×180mm试管 制三糖铁培养基 5、13×100mm试管 制蛋白胨水等 6、1ml移液管 7、10ml移液管 8、直径为90mm平皿5副 制SS、EMB平板 9、250ml量筒 1个 10、玻璃棒 11.、恒水浴箱1个 12、显微镜1台镜检第5页，共19页，星期日，2025年，2月5日培养基与试剂GN增菌液 225ml/瓶 1瓶 500ml三角瓶EMB培养基 100ml/瓶 1瓶 250ml三角瓶SS琼脂 100ml/瓶 1瓶 250ml三角瓶三糖铁斜面 6ml/支 6支15×150mm试管葡萄糖半固体培养费基4ml/支 5支13×100mm试管蛋白胨水 2ml/支 5支13×100mm试管 5%乳糖发酵管 3ml/支 5支13×100mm试管甘露醇发酵管3ml/支 5支 13×100mm试管棉子糖发酵管 3ml/支 5支13×100mm试管 甘油发酵管 3ml/支 5支 13×100mm试管 第6页，共19页，星期日，2025年，2月5日四、实验步骤验步骤实流程图操作步骤第7页，共19页，星期日，2025年，2月5日流程图采样↓样品处理↓选择性增菌↓选择性平板划分↓生化实验↓镜检↓结果报告第8页，共19页，星期日，2025年，2月5日实验前的准备对烧杯、玻璃棒、移液管、试管、培养皿、锥形瓶的清洗注意：洗涤后的仪器应达到玻璃壁能被水均匀湿润而无条纹和水珠对试管、玻璃棒、移液管、锥形瓶、烧杯、培养皿进行包扎：要将报纸裁成5-10公分，成30°卷起，结尾处向上折叠即。包扎灭菌第9页，共19页，星期日，2025年，2月5日培养基的制备1.CN增菌液成分:胰蛋白胨20g柠檬酸钠5g磷酸二氢钾1.5g葡萄糖1g去氧胆碱酸钠0.5g氯化钠5g甘露醇2g磷酸氢二钾4g蒸馏水1000mlph7.0制法：按上述成分配好，加热溶解，校正PH。分装每瓶225ml，115C高温灭菌15min2、HE琼脂成分：蛋白胨12g水杨素2g蒸馏水1000ml乙液20ml牛肉膏3g胆盐20g0.4%溴麝香草芬兰钠溶液16ml乳糖12g氯化钠5g蔗糖12g琼脂20g甲液20mlHP7.5制法：将蛋白胨、乳糖、水杨素、氯化钠、蔗糖、牛肉膏、胆盐等溶解于400ml蒸馏水中作为基础液；加琼脂与600ml蒸馏水中，加热溶解。加入甲液乙液与基础液中，校正HP,再加指示剂。并与琼脂液合并，冷却，倾注平板，