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2.2动物细胞工程二、动物细胞融合技术与单克隆抗体“生物导弹”追踪癌细胞抗体
植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障,克服远缘杂交不亲和的障碍,培育出新的作物类型。
什么是动物细胞融合技术?单克隆抗体是如何制备的?在临床上有哪些应用?本节聚焦12
靶向药物是指被赋予了靶向(Targeting)能力的药物或其制剂。其目的是使药物或其载体能瞄准特定的病变部位,并在目标部位蓄积或释放有效成分。靶向制剂可以使药物在目标局部形成相对较高的浓度,从而在提高药效的同时抑制毒副作用,减少对正常组织、细胞的伤害。制备靶向药物的其中一种思路是将抗体等适配体能够与靶标分子特异性结合的探针分子通过化学或物理方法偶联到药物或其载体表面,从而赋予药物或其载体主动与靶标结合的能力
时间成果19世纪30年代观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞1858年观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。1875年第一个观察到脊椎动物(蛙类)的血液细胞发生融合的过程。1876年在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。1962年日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。1965年英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇(PEG)化学融合法。1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。20世纪80年代发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)动物细胞融合技术的发展历史动物细胞工程2.动物细胞融合
人体血液中的树突状细胞是一种具有很强的抗原呈递功能的淋巴细胞。近年来的研究发现,树突状细胞与肿瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,既能表达肿瘤抗原,又能合成激活T细胞的相关刺激分子。用此方法制成的肿瘤疫苗可以诱导机体产生较强的特异性免疫反应,这为癌症的治疗提供了新的方法。讨论:1.但如何才能让两个不同的细胞融合?2.细胞融合技术在生产实践中有哪些应用?到社会中去
19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象?旁栏思考P49病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。动物细胞工程2.动物细胞融合阅读课本P48,回答以下问题1.什么是动物细胞融合技术(概念)?原理是什么?2.所形成的杂种细胞有什么特点?3.诱导动物细胞融合的方法有哪些?4.动物细胞融合技术的意义和应用有哪些?
(1)动物细胞融合技术:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术诱导原生质体融合物理方法:电融合法、离心法化学方法:聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法(2)原理:细胞膜具有流动性诱导动物细胞融合物理方法:电融合法化学方法:聚乙二醇(PEG)融合法生物方法:灭活的病毒诱导法动物细胞工程2.动物细胞融合
病毒的灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力,但是并不破坏病毒的抗原结构。仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性(不感染细胞)保留融合活性(诱导细胞融合)灭活病毒诱导细胞融合的原理病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。动物细胞工程2.动物细胞融合1965年,研究证实了灭活的病毒在适当条件下确实可以诱导动物细胞融合。
(3)过程动物细胞工程2.动物细胞融合杂种细胞经第一次有丝分裂两个核才融合细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核
(4)结果:形成单核细胞,具有原来两个或多个细胞的遗传信息,可表现出两个或多个亲本的特点。思考:诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗?为什么?不一定,诱导A、B两种细胞融合,融合后可能有A、B未融合细胞及AA、AB、BB等多种细胞,因此细胞融合后需要进行筛选。动物细胞工程2.动物细胞融合①突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。(5)意义:
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导融合的方法意义和用途克服远源杂交的障碍,获得杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性植物细胞的全能性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理:电融合法、离心法化学:聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法物理:电融合法化学:PE
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