2.2.1 动物细胞培养课件高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养【本节聚焦】1.动物细胞培养需要哪些基本条件？2.动物细胞培养的基本操作过程是什么？3.怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险?第二章细胞工程

从社会中来在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么，怎样获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？通过细胞培养构建的人造皮肤可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增；目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。

从社会中来动物细胞工程常用的技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞工程的基础人造皮肤克隆猴：中中和华华单克隆抗体

一、动物细胞培养1.概念：从动物体中取出，将它分散成，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞的技术。相关的组织单个细胞生长和增殖取出分散适宜条件动物体组织单个细胞细胞生长和增殖2.原理：细胞增殖（有丝分裂）3.目的：获得细胞或者细胞产物

二、动物细胞培养的条件﹤动物细胞培养所需基本条件﹤营养条件其他条件糖类氨基酸无机盐维生素等适宜温度、pH和渗透压无菌、无毒的环境适宜的气体环境一般来说，动物细胞培养（模拟体内细胞正常生长增殖的环境）需要满足以下条件：

1.快速繁殖1.营养二、动物细胞培养的条件将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。（1）培养基构成：合成培养基血清等一些天然成分＋①合成培养基：②血清等一些天然成分：含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质（2）培养基类型：液体培养基（也称为培养液）2.无菌、无毒的环境(1)无菌：①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作培养液定期更换。(2)无毒：目的：以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。③添加一定量的抗生素

3.温度、PH、渗透压二、动物细胞培养的条件①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为；③适宜的渗透压：维持细胞正常的和功能。36.5±0.5℃7.2～7.4形态4.气体环境①组成及作用：细胞代谢所必需的维持培养液的pHO2：CO2：②具体操作：采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有_______________和__________的混合气体的____________中95%空气5%CO2CO2培养箱

传代培养放入CO2培养箱中培养取动物组织制成细胞悬液转入培养瓶或培养皿进行原代培养放入CO2培养箱中培养分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养三、动物细胞培养的过程

分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养一般取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。(1)对象:(2)原因:1.取动物组织三、动物细胞培养的过程2.分散成单个细胞(1)原因：①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖。②利于细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。(2)方法：用机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。

分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养3.制成细胞悬液方法：用培养液将细胞制成细胞悬液。三、动物细胞培养的过程4.原代培养(1)体外培养的动物细胞类型①悬浮细胞：②贴壁细胞：能够悬浮在培养液中生长增殖。需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。（大多数细胞属于这种类型）这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。——细胞贴壁要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。

分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养3.制成细胞悬液方法：用培养液将细胞制成细胞悬液。三、动物细胞培养的过程4.原代培养(2)细胞增殖受阻的原因①悬浮的细胞：②贴壁细胞：会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。除受上述因素影响外，还会发生接触抑制现象。

肿瘤细胞失去接触抑制适宜条件下在培养液可以无限增殖下去。癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少正常细胞平面观瓶壁上的细胞层数是：一层（或单层）癌变细胞失去接触抑制现象，可以在培养瓶中形成多层细胞正常细胞增殖到相互接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续增殖，出现接触抑制的现象。某些异常细胞能解除这种现象。体