2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

运用植物体细胞杂交技术，可以跨越不同种植之间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？去除细胞壁杂种细胞再生新细胞壁植物细胞融合脱分化移栽植物组织培养融合并筛选再分化

1970年人-鼠细胞融合实验灭活的仙台病毒诱导

第2章细胞工程第2节动物细胞工程二、动物细胞融合与单克隆抗体【本节聚焦】1.什么是动物细胞融合技术？2.单克隆抗体是如何制备的？在临床上有哪些应用？

一、动物细胞融合技术阅读P48-49，思考1.动物细胞融合技术的结果是？原理是？诱导方法有？意义是？应用有哪些？2.早期人们用怎样的方法获得抗体？该方法制备的抗体特点有？3.如何获得既能无限增殖又能产生抗体的细胞？4.结合图2-16，分析单克隆抗体的制备过程是怎样的？要经过几次筛选？

一、动物细胞融合技术1.概念：2.结果：3.原理：4.方法：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞就有原来两个或多个细胞的遗传信息。细胞膜具有一定的流动性。物理方法：电融合法等化学方法：聚乙二醇（PEG）融合法生物方法：灭活病毒诱导法

生物方法：灭活病毒诱导法灭活：是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。

P49思考：19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。

一、动物细胞融合技术5.意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。(1)已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。6.应用：人们可以按照预先的设计使不同细胞融合，至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得了成功。

植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志结果意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性果胶酶和纤维素酶去除细胞壁胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株得到杂交细胞打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能7.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较

(1)生产方法二、单克隆抗体及其应用向动物反复注射某种抗原使动物产生抗体从动物血清中分离所需抗体产量低、纯度低、特异性差1.传统抗体产生（多克隆抗体的产生）(2)缺点某种抗原抗体

【拓展1】对于一个抗原的刺激，每个B细胞只能合成并分泌一种识别抗原特定区域（抗原决定簇）的特异性抗体。只含有针对一个抗原决定簇的抗体称为单克隆抗体（纯度高，特异性强，能准确识别抗原并与之特异性结合）一个抗原可有多个不同的抗原决定簇，因此一个抗原可刺激B细胞产生多种浆细胞，不同的浆细胞可产生针对不同抗原决定簇的多种抗体。这种由同一抗原诱导产生的针对多个抗原决定簇的抗体称为多克隆抗体，即传统抗体（产量低、纯度低、特异性差）

克隆B淋巴细胞不具有无限增殖的能力，因此上述方案不可行。如何获得既能无限增殖又能产生抗体的细胞？一个B淋巴细胞B淋巴细胞群单克隆抗体产生动物体内产生的特异性抗体的种类超过百万种，但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此，要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。思考：如何制备单克隆抗体

如何获得既能无限增殖又能产生抗体的细胞？1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计实验获得了单克隆抗体，因此获得1984年诺贝尔生理学或医学奖。实验：把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合，所得到的融合细胞就可能大量增殖，产生足够数量的特定抗体。

二、单克隆抗体及其应用2.单克隆抗体制备过程

二、单克隆抗体及其应用2.单克隆抗体制备过程

二、单克隆抗体及其应用2.单克隆抗体制备过程注射特定抗原免疫小鼠培养小鼠骨髓瘤细胞多种B淋巴细胞骨髓瘤细胞多种细胞多种杂交瘤细胞抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射小鼠腹腔内增殖体外培养小鼠腹水细胞培养液单克隆抗体诱导融合筛选1①未融合的、②融合的具有同种核的、③融合的杂交瘤细胞选择培养基筛选2克隆化培养抗体检测既能大量增殖，又能产生抗体分泌的抗体能与特定的抗原结合

2.单克隆抗体制备过程二、单克隆抗体及其应用多种细胞

筛选1筛选2原因目的方法原