人CDO1和CELF4基因甲基化检测试剂盒(PCR-荧光探针法 )（CSZ2300316） (2).docx

受理号：CSZ2300316

体外诊断试剂产品注册技术审评报告

产品中文名称：人CDO1和CELF4基因甲基化检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

产品管理类别：第三类

申请人名称：北京起源聚禾生物科技有限公司

国家药品监督管理局

医疗器械技术审评中心

目录

基本信息 3

一、申请人名称 3

二、申请人住所 3

三、生产地址 3

技术审评概述 4

一、产品概述 4

二、临床前研究概述 5

三、临床评价概述 9

四、产品受益风险判定 10

综合评价意见 12

基本信息

一、申请人名称

北京起源聚禾生物科技有限公司

二、申请人住所

北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院5号楼4层401室

三、生产地址

北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院6号楼4层A区、北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院18号楼3层

技术审评概述

一、产品概述

（一）产品主要组成成分

产品试剂盒由以下组分组成，主要组成成分见下表。

表1试剂盒主要组成成分

序

号

产品组成

主要成分

规格及装量

12人份

24人份

1

人C1和C4甲基化反应液

Taq酶、Mg2+、dNTP等

180μL×1管

360μL×

1管

2

人C1和C4甲基化引探混合液

引物、探针

60μL×

1管

120μL×

1管

3

人C1和C4阳性质控品

含相关检测基因甲基化序列的质粒

30μL×

1管

60μL×1

管

4

人C1和C4阴性质控品

纯化水

30μL×

1管

60μL×1

管

注：不同批次之间同一组分不可相互替换。

（二）产品预期用途

本试剂盒用于体外定性检测人宫颈脱落细胞DNA中CDO1和CELF4基因的甲基化水平。

临床上与超声等其他诊断方法联合用于疑似子宫内膜癌患者的辅助诊断。检测结果阳性不能作为肿瘤早期诊断或者确诊的依据，检测结果阴性也不能排除子宫内膜癌的可能。临床医生应该结合患者病情及其他实验室检测指标等因素对检测结果进行综合判断。该检测不宜用于普通人群的肿瘤筛查。

DNA甲基化是表观遗传学中的一种，是在DNA5’端对胞嘧啶进行共价修饰，这种修饰通常与基因沉默相关。异常的甲基化在癌症的发生发展过程中起着重要作用。在以子宫内膜癌患者为对象的甲基化

研究中发现，CDO1(CysteineDioxygenaseType1)(简称C1)和CELF4(CUGBPElav-LikeFamilyMember4)(简称C4)基因CpG岛的甲基化水平比正常人明显升高，即发生超甲基化现象。多个病理确诊的子宫内膜癌病理研究报告都表明可以通过检测人宫颈脱落细胞DNA中C1和C4基因的甲基化情况来识别是否发生子宫内膜病变。

（三）产品包装规格

12人份∕盒、24人份∕盒。

（四）产品检验原理

本检测试剂盒采用重亚硫酸盐转化技术和荧光定量PCR技术对基因的甲基化情况进行定性检测，具体如下：

重亚硫酸盐转化：将提取的宫颈脱落细胞DNA利用重亚硫酸盐转化，使未发生甲基化的胞嘧啶转变成尿嘧啶，而发生甲基化的胞嘧啶则不会发生转变；

荧光定量PCR：利用特异性引物结合荧光探针技术，检测DNA样本中是否存在发生甲基化的位点。特异性引物能够选择性地扩增发生甲基化的基因，而荧光探针在Taq酶的作用下水解释放荧光，在实时荧光定量PCR仪上进行DNA样本的甲基化检测。

二、临床前研究概述

（一）主要原材料

1.主要原材料的选择

本产品主要原材料包括：甲基化反应液、引物和探针、菌液，均通过外购的方式获得。其中引物和探针由申请人自行设计，由合成公

司经过合成和纯化后获得；菌液基因序列由申请人自行设计，由合成公司负责合成提供。

申请人对主要原材料进行了供应商的选择，通过功能性实验筛选出合格供应商，制定了各主要原材料的质量标准并经检验合格。

2.企业参考品和对照品的设置情况

包括阴性参考品、阳性参考品、精密度参考品以及最低检测限参考品。

阴性参考品9份，包括不同浓度CDO1和CELF4甲基化均为阴性的样本，其他常见甲基化基因阳性的样本以及含有内、外源性干扰物质样本。阳性参考品9份，包括不同浓度不同甲基化比例的CDO1单基因、CELF4单基因以及CDO1和CELF4双基因甲基化阳性的样本。精密度参考品3份，包括不同浓度不同甲基化比例的CDO1和CELF4双基因甲基化阳性样本以及CDO1和CELF4均为甲基化阴性的样本。最低检