3.2 基因工程的基本操作程序（第1课时）课件-【知识精研】高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

3.2基因工程的基本操作程序-1;本节聚焦;;基因工程的基本操作程序;基因的结构;1.定义：;1.较为有效的方法之一;Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体。;;10;根据已知的氨基酸序列合成DNA;12;基因文库的构建;PCR由穆里斯等人（先入为主）于1985年发明，为此，穆里斯于1993年获得诺贝尔化学奖;（1）PCR技术：;参与的组分;②模板：DNA母链;1）变性：

当温度上升到_______以上时，断裂，双链DNA解聚为两条。;2）复性：

当温度下降到50℃左右时，两种引物通过与两条单链DNA结合。;3）延伸：

当温度上升到______左右时，溶液中的4种____________在耐高温的____________的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。;;★4、PCR扩增时至少需要______种引物，原因是：;;【例1】设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。;第二轮循环的产物;①DNA分子有_____个

②总链数_____条

③不含引物的链数：___

④含引物的链数_____

⑤含引物1或2的链数：______

⑥仅含引物1的DNA数：______

⑦仅含引物2的DNA数：______

⑧引物1、2均含有的DNA数：_____

⑨不含引物的DNA数：______

⑩需要引物的总数：______

;;用PCR技术将DNA分子中的A1片段进行扩增，设计了引物Ⅰ、Ⅱ，其连接部位如下图所示，X为某限制酶识别序列。扩增得到的绝大部分DNA片段是图A-D中的（）;（7）PCR技术扩增与DNA复制的比较;拓展：比较PCR反应与体内DNA复制所需的基本条件;用PCR可以扩增mRNA吗？;;DNA分子具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷，在电场的作用下，这些带电分子会向着它所带电荷相反的电极移动，这个过程就叫电泳。

PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300纳米的紫外灯下被检测出来。;琼脂糖凝胶电泳;结果分析与评价;用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1??为DNA标准样液(Marker)，10号为蒸馏水。PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析不合理的是()